Durante la cromatografia su strato sottile, un tecnico posiziona macchie di una miscela chimica su una lastra piana rivestita con uno strato di materiale assorbente, quindi pone la parte inferiore della lastra nel solvente. Man mano che il solvente risale la piastra, le sostanze chimiche nella miscela salgono con essa a velocità diverse, quindi si separano. Questo test determina quali sostanze chimiche sono presenti in una miscela confrontando i tassi di viaggio di sconosciuti con standard noti. I risultati, tuttavia, possono essere influenzati da molti fattori.
TL; DR (troppo lungo; non ho letto)
I valori del fattore di ritenzione nella cromatografia su strato sottile sono influenzati dall'assorbente, dal solvente, dalla piastra cromatografica stessa, dalla tecnica di applicazione e dalla temperatura del solvente e della piastra.
Fattori di ritenzione
Il fattore di ritenzione per una sostanza chimica durante la cromatografia su strato sottile è una misura di quanto si sposta lungo la lastra in risposta al movimento del solvente. Poiché il movimento assoluto della sostanza chimica dipende dalla distanza percorsa dal solvente, si calcolano i valori del fattore di ritenzione relativi al grado di movimento del solvente. Il fattore di ritenzione per una sostanza chimica è la distanza verticale percorsa dalla sostanza chimica dal punto in cui si trovava originariamente applicato sulla lastra, diviso per la distanza percorsa dal solvente — misurata dalla stessa partenza punto.
Piastra per cromatografia su strato sottile
La stessa lastra cromatografica su strato sottile può influenzare il valore del fattore di ritenzione ottenuto per una determinata sostanza chimica. Le piastre per cromatografia su strato sottile possono essere rivestite con una varietà di solidi assorbenti; più frequentemente silice o allumina. Poiché il fattore di ritenzione si basa sull'affinità relativa della sostanza chimica per l'assorbente rispetto al solvente, la modifica dell'assorbente può modificare notevolmente il fattore di ritenzione. Inoltre, lo spessore e l'uniformità dello strato di assorbente possono variare da lastra a lastra, soprattutto se lavorate a mano. Questi fattori possono anche modificare il valore del fattore di ritenzione per le sostanze chimiche.
Fattori di ritenzione degli impatti del solvente
Poiché il solvente trasporta la sostanza chimica su per la piastra, il particolare solvente utilizzato avrà anche un impatto sostanziale sul valore del fattore di ritenzione per la sostanza chimica. Un solvente che ha un'interazione più forte per una particolare sostanza chimica supererà più facilmente qualsiasi affinità della sostanza chimica per lo strato assorbente, e spostare quella sostanza chimica più lontano in un dato periodo di tempo. Anche le miscele di solventi possono avere effetti diversi a seconda della proporzione di ciascun solvente.
Altri fattori
Ci sono alcuni altri fattori che possono influenzare il fattore di ritenzione in alcuni casi. La temperatura del solvente e della piastra può apportare lievi variazioni, poiché, ad esempio, il solvente può spesso sciogliere meglio le sostanze chimiche che trasporta a temperature più elevate. Anche la tecnica del tecnico nell'applicare il campione alla piastra può modificare il fattore di ritenzione. L'applicazione di una quantità eccessiva di campione può provocare la formazione di bande larghe e diffuse di sostanza chimica che si spostano verso l'alto sulla piastra, rendendo difficile misurare con precisione la distanza per cui la sostanza chimica è stata trasportata.