Esistono molti metodi per separare e identificare diversi composti. cromatografia è la scienza che permette di separare i componenti di una miscela. Il Rf (a volte scritto informalmente come "valore rf") ne fa parte.
Esistono molti tipi diversi di cromatografia. Qui, l'obiettivo è il tipo più semplice di cromatografia: cromatografia su carta o cromatografia su strato sottile (TLC). Entrambi utilizzano la stessa procedura generale, descritta di seguito.
Cosa comporta la cromatografia?
Tutti i tipi di cromatografia hanno a fase stazionaria e un fase mobile. La fase stazionaria, come si può intuire dal nome, non si muove. Nella cromatografia su carta, la fase stazionaria è la carta stessa.
Per iniziare la separazione dei composti, la sostanza da analizzare viene punteggiata sul bordo inferiore del pezzo di carta. Quindi la carta viene posta in un bicchiere contenente la fase mobile, che è un solvente. Il solvente dovrebbe trovarsi sotto il punto in cui è punteggiata la sostanza da analizzare. Non deve immergere l'analita.
Il liquido risale la carta per capillarità. Se l'analita o parte dell'analita è attratto dalla fase mobile, si muoverà con essa. Se ha un'attrazione più forte per la fase stazionaria, non si muoverà.
Dopo che il solvente è salito in una certa misura nella fase stazionaria, hai un cromatogramma. Questo cromatogramma ti dice qualcosa sulla separazione dei diversi componenti in una miscela o ti dice quale sostanza hai. Come?
Separazione e identificazione dei componenti utilizzando un cromatogramma
Se le condizioni per lo sviluppo di un cromatogramma sono le stesse, la distanza percorsa da una particolare sostanza dovrebbe cambiare. Questa distanza è misurata da formula del fattore di ritenzione o Rf.
La formula del fattore di ritenzione è:
Questo valore dovrebbe essere lo stesso per una sostanza quando il cromatogramma è sviluppato nello stesso modo.
Questo è utile quando si dispone di una miscela di sostanze.
Ad esempio, supponiamo di avere quattro campioni: tre sono standard e uno è una miscela. Il tuo compito è identificare quali componenti sono presenti nella miscela.
Cosa sono gli standard? Gli standard sono un puro campione di una sostanza. Questo può essere eseguito sul cromatogramma come confronto.
La miscela può essere eseguita, dopodiché è possibile determinare la distanza di esecuzione dei diversi componenti.
Say Standard #1 ha una forte affinità per l'acqua (la fase mobile). Ciò significa che viaggerà sulla carta con la fase mobile. Lo standard n. 2 ha invece una forte affinità con la carta. Ciò significa che rimarrà con la fase stazionaria. Infine, lo Standard n. 3 ha un'affinità sia per l'acqua che per la carta. Prevedi che si sposterà di un importo intermedio.
Scoprirai che il solvente si sposta di 5,7 cm mentre lo standard n. 1 si sposta di 0,5 cm, lo standard n. 2 si sposta di 4,8 cm e lo standard n. 3 si sposta di 2,9 cm. Cosa sono le Rf valori per ogni standard?
Ora conosci la Rf valori per gli standard. Successivamente, su un altro pezzo di carta, metti un punto della miscela e lascia che il cromatogramma si sviluppi mettendolo in acqua.
Una volta rimosso, scopri che ci sono due punti che si sono separati dal punto iniziale che hai posizionato. Questo probabilmente significa che ci sono solo due componenti nella tua miscela. Successivamente, è necessario capire a quale degli standard corrispondono questi due componenti. Per fare ciò, misuri Rf valori.
Il solvente si è spostato di 4,5 cm. Un componente (chiamato componente 1) si è spostato di 2,2 cm e l'altro si è spostato di 3,9 cm (chiamato componente 2). Per vedere a quale standard corrispondono questi componenti sarà necessario utilizzare la formula del fattore di ritenzione per calcolare l'Rf valori.
Dati questi Rf valori, è probabile che il componente 1 corrisponda allo Standard #3 poiché R sincef i valori sono molto simili. Il componente 2 è probabilmente lo Standard #2.