Indipendentemente dal fatto che sia necessario degasare o disaerare, la soluzione tampone dipenderà dalla sua applicazione. Se la presenza di ossigeno in eccesso nel tampone influenzerà la reazione chimica che stai cercando, o se la formazione di bolle d'aria nella soluzione influenzerà le letture o il flusso, dovrai degassare il tuo buffer. Questo articolo presuppone che tu abbia già preparato il tuo buffer e lo abbia filtrato se necessario.
Il degasaggio sotto vuoto è il modo più comune per rimuovere l'aria da una soluzione tampone. Metti la tua soluzione in una fiaschetta con un'ancoretta e usa un tappo di gomma per sigillare la parte superiore. Mettere la beuta su una piastra e accendere la piastra in modo che l'ancoretta giri a una velocità media. Questo aiuta a far uscire l'aria dalla soluzione. Collegare il tubo per il sistema del vuoto al braccio laterale del pallone e accendere il vuoto a bassa velocità. Lasciar degassare la soluzione per almeno un'ora.
Utilizzando la stessa configurazione con il pallone a braccio laterale e il vuoto, è possibile omettere la piastra di agitazione e l'ancoretta e posizionare il pallone in un sonicatore. Il sonicatore utilizza onde sonore che rilasceranno più aria dalla soluzione rispetto alla barra di agitazione.
Lo spargimento di elio, chiamato anche gorgogliamento di elio o spurgo di gas inerte, è uno dei modi più efficaci per degassare il tampone se si dispone di una linea di elio nel laboratorio. Posiziona una fritta sparging - un connettore che ha un filtro simile a una pietra all'estremità - all'estremità della linea dell'elio e posiziona la linea e la fritta nella soluzione. Accendere l'elio a una pressione molto bassa per circa cinque minuti per consentire all'elio di rimuovere l'ossigeno. Potrebbe essere necessario ripetere ogni giorno.
Alcuni sistemi di cromatografia disporranno di un sistema di degasaggio della soluzione in linea. Il sistema rimuoverà il gas dal tampone prima che venga inviato attraverso la colonna cromatografica. Non devi degasare la tua soluzione in anticipo. Tuttavia, se si verificano disturbi della linea di base sul cromatogramma, è necessario considerare il degasaggio utilizzando uno dei metodi sopra indicati oltre all'utilizzo del degasatore in linea.
