Tes Western blot, juga disebut immunoblotting, adalah tes untuk protein tertentu dalam campuran protein. Tes Western blot dilakukan setelah elektroforesis gel atau tes enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), dan tes ini menggunakan antibodi untuk mengidentifikasi protein spesifik.
Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) adalah tes umum yang digunakan untuk memisahkan protein untuk digunakan dalam Western blot. Protein dipisahkan oleh berat dan sifat listrik saat mereka bergerak melalui matriks gel.
Tes ELISA menggunakan enzim atau antibodi yang menempel pada permukaan padat untuk membuat permukaan tes. Sampel kemudian ditambahkan ke permukaan uji. Antibodi atau enzim yang bereaksi atau menempel pada protein menunjukkan hasil yang positif.
Tes Western blot dilakukan setelah elektroforesis gel. Protein yang dipisahkan ditransfer (atau dihapus) ke membran nitroselulosa atau nilon dan diidentifikasi oleh antibodi spesifik yang ditandai oleh protein sekunder.
Tes Western blot digunakan untuk mengkonfirmasi hasil positif dari tes elektroforesis gel atau ELISA. Tes Western blot dapat mengidentifikasi protein secara lebih spesifik dan dapat mengesampingkan hasil positif palsu.