Teknik untuk Memisahkan Bakteri dalam Kultur Campuran

Ahli mikrobiologi, genetika, dan biologi molekuler menggunakan kultur bakteri untuk menemukan rahasia kehidupan. Ahli mikrobiologi mempelajari bakteri untuk menemukan antibiotik baru untuk mengobati infeksi. Ahli genetika menggunakan bakteri untuk menentukan apakah bahan kimia mungkin memiliki sifat karsinogenik. Ahli biologi molekuler mempelajari jalur biokimia dari proses seluler untuk memahami fungsi enzim yang kita miliki bersama dengan bakteri. Meskipun penelitiannya bervariasi, ketiga ilmu tersebut mengisolasi kultur bakteri dengan menggunakan teknik yang sama: penggoresan lempeng agar.

Dasar Mikroba Micro

Banyak bakteri memiliki bentuk khas yang membantu klasifikasi.

•••Chad Baker/Photodisc/Getty Images

Mikroba adalah organisme bersel tunggal seperti bakteri dan jamur. Organisme ini berkembang biak dengan cepat dan mudah tumbuh, membuatnya sangat berguna untuk dipelajari. Ketika mikroba baru yang berpotensi ditemukan di alam, sampel ditempatkan ke dalam media pertumbuhan yang disebut "kaldu." kaldu terdiri dari air steril, garam, gula, dan nutrisi lain yang akan mendorong pertumbuhan bakteri yang cepat dalam labu selama: inkubasi. Namun, lebih sering daripada tidak, kaldu akan mengandung lebih dari satu jenis bakteri. Untuk mengisolasi bakteri tunggal, ilmuwan akan menyebarkan sampel kecil kaldu di atas piring agar semipadat menggunakan teknik mikroba yang disebut "goresan".

Piring Agar-agar

Mengenakan sarung tangan saat menangani pelat agar-agar mencegah bakteri dari tangan Anda mencemari sampel Anda.

•••Gambar Comstock/Comstock/Getty

Pelat agar adalah gel semi-transparan, semi-padat yang terdiri dari rumput laut dan konsentrasi nutrisi tertentu. Kegunaan agar-agar terletak pada kenyataan bahwa ia menyediakan permukaan yang halus dan lembut untuk pertumbuhan bakteri. Ketika seorang ilmuwan menempatkan bakteri tunggal pada agar-agar, itu akan berkembang biak dengan menggandakan dirinya sendiri ribuan kali dan akan muncul sebagai koloni kecil sel tunggal.

Alat Penggores Bakteri

Alat dasar untuk menggores koloni bakteri tidak berubah sejak ditemukannya teknik ini.

•••Photos.com/Photos.com/Getty Images

Penggoresan bakteri membutuhkan tiga alat: pelat agar, pembakar alkohol, dan loop kawat. Pelat agar adalah media pertumbuhan tempat bakteri dipindahkan setelah tumbuh dalam kaldu. Pembakar alkohol adalah lampu kecil berisi alkohol untuk mensterilkan lilitan kawat — pegangan panjang dan ramping dengan lilitan kecil kawat tahan api yang terpasang di salah satu ujungnya. Lingkaran akan menahan setetes kecil kaldu berisi bakteri saat memindahkan bakteri dari kaldu ke piring agar.

Proses Pengolesan Bakteri

Gerakan zig-zag adalah cara paling efektif untuk menyebarkan bakteri di piring agar-agar.

•••Hemera Technologies/Photos.com/Getty Images

Menggores bakteri di piring agar-agar itu sederhana, tetapi Anda harus melakukan langkah ini dengan benar atau Anda tidak akan mengisolasi koloni yang terpisah. Panaskan loop di atas pembakar alkohol untuk mensterilkan kawat, lalu celupkan ujung loop ke dalam kaldu. Luruskan ujung loop bolak-balik beberapa kali di atas seperempat pelat agar-agar. Sterilkan loop lagi, dan coret melintang dan tegak lurus dengan coretan pertama. Pindahkan loop bolak-balik beberapa kali di atas bagian pelat yang baru. Sterilkan ujungnya. coret ringan di bagian yang terakhir dicoret satu kali dan gerakkan loop bolak-balik beberapa kali. Goresan mengencerkan tetesan awal kaldu ke titik di mana goresan terakhir akan berisi koloni tunggal. Tempatkan piring di inkubator atau di atas meja pada suhu kamar, dan tunggu koloni tumbuh semalaman. Koloni tunggal pada coretan terakhir akan menjadi koloni terisolasi dari bakteri tunggal.

  • Bagikan
instagram viewer