Selama kromatografi lapis tipis, teknisi menempatkan bintik-bintik campuran kimia pada pelat datar yang dilapisi dengan lapisan bahan penyerap, kemudian menempatkan bagian bawah pelat dalam pelarut. Saat pelarut bergerak ke atas piring, bahan kimia dalam campuran bergerak dengan kecepatan yang berbeda, sehingga mereka terpisah. Tes ini menentukan bahan kimia mana yang ada dalam campuran dengan membandingkan tingkat perjalanan yang tidak diketahui dengan standar yang diketahui. Hasilnya, bagaimanapun, dapat dipengaruhi oleh banyak faktor.
TL; DR (Terlalu Panjang; Tidak Membaca)
Nilai faktor retensi dalam kromatografi lapis tipis dipengaruhi oleh penyerap, pelarut, pelat kromatografi itu sendiri, teknik aplikasi dan suhu pelarut dan pelat.
Faktor Retensi
Faktor retensi bahan kimia selama kromatografi lapis tipis adalah ukuran seberapa jauh bahan tersebut bergerak ke atas pelat sebagai respons terhadap pergerakan pelarut. Karena pergerakan absolut bahan kimia bergantung pada seberapa jauh perjalanan pelarut, Anda menghitung nilai faktor retensi relatif terhadap tingkat pergerakan pelarut. Faktor retensi untuk suatu bahan kimia adalah jarak vertikal yang dipindahkan oleh bahan kimia dari tempat bahan itu berada awalnya diterapkan pada pelat, dibagi dengan jarak yang ditempuh oleh pelarut — diukur dari awal yang sama titik.
Plat Kromatografi Lapis Tipis
Pelat kromatografi lapis tipis itu sendiri dapat mempengaruhi nilai faktor retensi yang diperoleh untuk bahan kimia tertentu. Pelat kromatografi lapis tipis dapat dilapisi dengan berbagai padatan penyerap; paling sering silika atau alumina. Karena faktor retensi didasarkan pada afinitas relatif bahan kimia untuk penyerap dibandingkan dengan pelarut, mengubah penyerap dapat sangat mengubah faktor retensi. Juga, ketebalan dan keseragaman lapisan penyerap dapat bervariasi dari satu pelat ke pelat lainnya, terutama jika dibuat dengan tangan. Faktor-faktor ini juga dapat mengubah nilai faktor retensi untuk bahan kimia.
Faktor Retensi Dampak Pelarut
Karena pelarut membawa bahan kimia ke atas pelat, pelarut tertentu yang digunakan juga akan memiliki dampak besar pada nilai faktor retensi bahan kimia. Pelarut yang memiliki interaksi yang lebih kuat untuk bahan kimia tertentu akan lebih mudah mengatasi afinitas bahan kimia untuk lapisan penyerap, dan memindahkan bahan kimia itu lebih jauh dalam periode waktu tertentu waktu. Campuran pelarut juga dapat memiliki efek yang berbeda tergantung pada proporsi masing-masing pelarut.
Faktor lain
Ada beberapa faktor lain yang dapat mempengaruhi faktor retensi dalam beberapa kasus. Suhu pelarut dan pelat dapat membuat sedikit perubahan, karena, misalnya, pelarut seringkali dapat melarutkan bahan kimia yang diangkutnya dengan lebih baik pada suhu yang lebih tinggi. Teknik teknisi dalam menerapkan sampel ke pelat juga dapat mengubah faktor retensi. Menerapkan terlalu banyak sampel dapat menyebabkan pita bahan kimia yang besar dan menyebar bergerak ke atas pelat, sehingga sulit untuk mengukur jarak bahan kimia yang telah diangkut secara akurat.
