Larutan penyangga menahan perubahan pH karena mengandung konjugat asam-basa lemah yang menetralkan ion H+ dan OH-. Larutan penyangga terdiri dari asam atau basa lemah dan garam dari asam atau basa tersebut. Pemilihan sistem buffer yang tepat tergantung pada kisaran pH buffering. Sebagian besar reaksi biologis terjadi pada kisaran pH 6 hingga 8. Buffer fosfat menyangga pada kisaran pH 6,5 hingga 7,5. Buffer asam karboksilat berguna dari pH 3 hingga 6. Buffer borat berfungsi dari pH 8,5 hingga 10. Buffer asam amino seperti glisin dan histidin bekerja pada rentang pH yang beragam. Buffer Tris adalah salah satu sistem buffer yang paling umum digunakan di laboratorium biologi. Perhitungan untuk solusi buffer Tris akan digunakan dalam contoh berikut, tetapi metodologi ini berlaku untuk semua solusi buffer.
Gunakan produk dari molaritas dan volume larutan akhir untuk menentukan mol basa yang dibutuhkan. Misalnya, jika diperlukan 2 liter larutan buffer Tris 0,1 M, maka jumlah mol Tris yang diperlukan adalah:
Hitung massa buffer yang dibutuhkan dengan mengalikan jumlah mol yang dibutuhkan dengan berat molekul basa. Misalnya, massa 0,2 mol basa Tris sama dengan:
Larutkan basa dalam air suling menggunakan batang pengaduk magnet dan hot plate pengaduk. Larutkan dalam volume air hanya sedikit kurang dari volume larutan akhir (950-975 mL untuk setiap liter larutan akhir). pH buffer Tris berubah dengan konsentrasi dan perlu penyesuaian ulang jika volume awal yang digunakan terlalu kecil. Juga paling baik untuk menyiapkan buffer pada suhu yang sama dengan yang akan digunakan selama pengujian atau percobaan karena Tris memiliki perubahan pH yang bergantung pada suhu yang besar.
Tips
- Untuk menghemat waktu saat menyiapkan larutan buffer, Anda dapat menggunakan konsentrat buffer premade pada pH yang diperlukan dan encerkan untuk molaritas dan volume yang diinginkan. Siapkan larutan buffer pada suhu yang sama dengan yang akan digunakan untuk menghindari perubahan pH yang signifikan. Hindari penyesuaian pH yang memakan waktu, titrasi hanya setelah pengenceran ke konsentrasi yang diinginkan. Pelarutan dalam volume yang terlalu kecil akan menyebabkan titrasi berulang.
Peringatan
- Berhati-hatilah saat menangani asam dan basa. Kenakan kacamata pelindung.
tentang Penulis
Carla Boulianne adalah ahli biologi evolusioner dengan pelatihan dan penulis lepas dengan semangat. Selain menulis untuk Demand Studios dan eHow, dia adalah penulis fitur untuk Mengasuh Anak Berbakat di Suite101.com. Dia senang mengeksplorasi topik baru melalui penelitian ekstensif.
Kredit Foto
Foto milik Emmi P. @morgueFile.com