Apa yang Divariasikan Saat Menguji Pengaruh pH pada Aktivitas Enzim?

Ketika Anda menguji efek pH pada aktivitas enzim, Anda harus memvariasikan pH. Namun, Anda dapat melakukan ini dengan cara yang baik atau buruk. Ingatlah faktor tambahan apa yang dapat mengacaukan efek dari berbagai pH. Jika tidak, hasil yang diperoleh mungkin bukan karena perubahan pH, tetapi beberapa faktor lain. Mengetahui cara memvariasikan pH dengan benar dan faktor apa yang mengacaukan pH eksperimen akan membantu Anda mendapatkan hasil yang baik dan memahami mengapa hasil Anda mungkin tidak persis seperti yang Anda harapkan.

Saat menguji pengaruh pH pada aktivitas enzim, variasikan hanya pH sambil menjaga faktor lain tetap konstan. Faktor-faktor lain termasuk konsentrasi enzim, konsentrasi substrat dan suhu. Faktor-faktor yang tetap konstan disebut variabel kontrol. Variabel kontrol memungkinkan Anda untuk menyimpulkan bahwa hasil aktivitas enzim yang diperoleh dalam percobaan Anda disebabkan oleh variasi pH, variabel independen. Mengetahui faktor apa yang tidak berubah dalam percobaan sama pentingnya dengan mengetahui faktor apa yang bervariasi, jika tidak, akan sulit untuk menyimpulkan apakah hasilnya benar-benar disebabkan oleh satu hal yang diuji.

pH suatu larutan dapat diubah dengan melarutkan sejumlah asam atau basa dalam air. Salah satu cara untuk menguji pengaruh pH pada aktivitas enzim adalah dengan menambahkan tetes asam kuat atau basa kuat secara bertahap ke dalam larutan yang mengandung enzim, kemudian amati titik di mana aktivitas enzim melambat atau berhenti. Asam didefinisikan sebagai senyawa yang menyumbangkan ion hidrogen, yang disebut proton (H+), dan basa didefinisikan sebagai senyawa yang menyumbangkan ion hidroksida (-OH). Asam dan basa yang berbeda memiliki jumlah proton atau ion hidroksida yang berbeda untuk diberikan. Tidak semua proton atau ion hidroksida segera disumbangkan ketika asam atau basa ditambahkan ke larutan, tetapi jumlah proton atau ion hidroksida yang disumbangkan mengubah pH pada tingkat yang berbeda. Oleh karena itu, merupakan ide yang baik untuk memvariasikan pH dalam percobaan enzim yang hanya menggunakan satu jenis asam atau satu jenis basa. Jika tidak, variabel lain tidak sengaja ditambahkan.

Beberapa percobaan laboratorium yang mempelajari aktivitas enzim melibatkan penggilingan jaringan segar untuk melepaskan enzim dari sel dan kemudian menambahkan substrat untuk mengukur aktivitas enzim. Jaringan segar mengandung darah. Karena adanya enzim dalam darah yang mengubah gas karbon dioksida yang terlarut dalam darah menjadi asam karbonat, jaringan itu sendiri dapat mempengaruhi pH. Jadi, dalam percobaan yang melibatkan aktivitas enzim dalam jaringan segar, akan sangat membantu untuk mencuci darah dalam gelas berisi air dingin sebelum menggiling jaringan. Ini akan meminimalkan perubahan pH yang tidak diinginkan karena jaringan, sehingga perubahan pH yang disengaja dapat dipelajari.

Seperti dibahas di atas, konsentrasi enzim merupakan faktor kontrol yang tidak boleh divariasikan saat menguji pengaruh pH terhadap aktivitas enzim. Namun, prosedur eksperimental masih secara inheren memvariasikan konsentrasi enzim dengan cara yang halus. Jika seseorang menggunakan larutan murni enzim, maka konsentrasi enzim tetap konstan. Namun, dalam percobaan di mana enzim berasal dari jaringan segar, seperti potongan kentang, potongan tanaman, atau potongan hati, ukuran potongan mengubah jumlah enzim di setiap tabung reaksi. Dengan demikian, akan sangat membantu untuk memotong potongan-potongan jaringan seseragam mungkin. Ini adalah contoh lain tentang bagaimana mengetahui apa yang tidak boleh diubah, dan mengapa sulit untuk tidak menghindari perubahan sepenuhnya, membantu menginterpretasikan hasil dari berbagai faktor seperti pH.