Az egyik klasszikus módszer a mikrobák koncentrációjának meghatározására a mintában a minta hígítása, a mikrobák lemezeken történő növesztése és a telepek megszámlálása. A bevont mikrobák egy vagy több sejtből álló telepképző egységből látható, látható és megszámlálható telepekké nőnek. A baktériumok a leggyakoribb mikrobák, amelyek a lemezszám alapján értékelik. A telepszámlálást a talajban, a vízben és az élelmiszerekben található mikrobák kimutatására és számlálására használják. A telepek számlálásának protokolljai a pontos és módszeres megközelítést hangsúlyozzák.
Hígító minták, lemezelés és inkubálás
Ha egyszerűen egy mikrobamintát ken egy agarlemezre, annyi kolóniaképző egységet lát, hogy az egyes telepek összeolvadnak, és lehetetlenné teszik számolásukat. A probléma megoldásához keverje a mintát folyékony közegbe, vegyen egy kis mennyiségű keveréket és tovább hígítsa. Ismételje meg ezt a folyamatot hat-tízszer. Kenje el a végső hígítást egy agarlemezen, és inkubálja négy-hét napig, mielőtt megszámolja a telepeket.
Kézi számlálás
A telepek számlálásának elsődleges trükkje az, hogy minden teleppontot egyszer meg kell számlálni. Az egyik megközelítés az, ha a Petri-csészét rács háttérre helyezzük, és megszámoljuk az egyes rácssejtek telepeit, módszeres mintázatban haladva az összes sejten. A megszámlált telepek megjelölése a Petri-csésze hátulján szintén hasznos megközelítés lehet. Általában legalább három lemezt kell megszámolnia; csak 30–300 telepet tartalmazó lemezeket használjon szilárd következtetések levonására - javasolja a mikrobiológiai hálózat, amely laboratóriumok és gyártók számára nyújt tanácsadási szolgáltatásokat. Azokat a lemezeket, amelyek telepei túl sokak ahhoz, hogy megszámlálhassák, vagy túl kevés telepet kell új hígításból újból lemezezni.
Automatizált számlálás
Az emberi tévedés növeli a telepek kézi számlálásához szükséges időt. A pontosság és a hatékonyság javítása érdekében helyezze a Petri-csészét egy automatikus telepszámláló készülékbe. Az automatizált telepszámlálók képet készítenek az edényről, elválasztják a telepeket a háttérről, majd algoritmus segítségével megszámolják a lemezen lévő telepeket. Az algoritmusoknak nehézségei lehetnek a telepek megkülönböztetésével, amikor két vagy több telep egymáshoz ér, így ez a folyamatos szoftverfejlesztés területe.
A számolás bonyolultabbá tétele
A telepszámlálásból származó mikroba-sűrűség kiszámításának pontossága bizonyos korlátokkal jár. A kolóniaképző egységek lehetnek egyetlen sejt, egy sejtlánc vagy egy egész sejtcsomó. Az a feltételezés, hogy a telep egy sejtet képvisel, így a telepszám alapján számított koncentrációk alacsonyak lehetnek. A különböző mikrobáknak eltérő növekedési körülményekre van szükségük, és a lemezen lévő telepek csak azokat a mikrobákat képviselik, amelyek ezen a növekedési táptalajon fejlődnek ezen inkubációs körülmények között. Ezenkívül a telepszámlálás nem regisztrálja az elhalt sejteket, ami fontos szempont, amikor szükség van az eredeti minta sejtkoncentrációjára.
