A nagy teljesítményű folyadékkromatográfia (HPLC) laboratóriumi technika a vegyületek szétválasztására és azonosítására. Ez egy olyan oszlopkromatográfia, amely az oldatokban a vegyületek különböző polaritására támaszkodik az elválasztáshoz. A HPLC különbözik a szokásos oszlopkromatográfiától, mivel nyomást alkalmaz az oldat gyorsabb átkényszerítésére az oszlopon, ezért gyorsabb, és néha pontosabb eredményeket produkál. A cél az, hogy a vegyületeket elkülönítsük az oszlopból, és külön-külön távozzuk őket.
A HPLC sebessége és a vegyületek különböző polaritásán alapuló két vegyület miatt hasonló felépítés és polaritások léphetnek ki a kromatográfiás készülékből egyszerre vagy közel azonosak idő. Ezt koelúciónak nevezik. A koelúció megnehezíti a keverék mely pontján eluálódó részének pontos meghatározását.
A HPLC tipikusan különböző anyagból készült gyöngyökkel töltött üvegoszlopot használ. Az oszlopon keresztül kényszerített keverékek vegyi anyagokkal rendelkeznek, amelyek különböző erősséggel kötődnek a gyöngyökhöz. A kötés erőssége, amely a polaritás hasonlóságától függ, meghatározza, hogy a vegyi anyag mennyi ideig kötődik a gyöngyhöz, mielőtt felszabadulna. Egyes vegyületek olyan erősen kötődnek, hogy lényegében soha nem szabadulnak fel az oszlop gyöngyéből, és soha nem mérik az oszlopból kilépő oldatban.
A tipikus laboratóriumi szétválasztási technikák egy vizsgálat vagy szétválasztási módszer kidolgozását foglalják magukban, majd a vizsgálat végrehajtását az egyes vegyületek és az oldatok elválasztására. Ez azonban általában több megoldást eredményez, amelyeken szintén eljárásokon kell átesni, ami a komplexitás exponenciális növekedéséhez vezet. Bár a HPLC gyakran leegyszerűsítheti és felgyorsíthatja ezt a folyamatot, a HPLC készülék kifejlesztésének költsége óriási lehet. A HPLC készülék kifejlesztése, bár sokkal hatékonyabb, sokkal költségesebb, mint a vegyületek elválasztására szolgáló egyéb vizsgálatok kifejlesztése. Emiatt sok kicsi, magántulajdonban lévő laboratórium pénzügyi szempontból nem életképes.
A HPLC-t nemcsak az egyszerű vegyületek szétválasztására használják, hanem arra is, hogy specifikus fehérjéket izoláljon egy sejtkeverékből. Ebben az esetben az oszlopban található gyöngyöket általában egy olyan antitesttel vonják be, amely specifikus a gyűjteni kívánt fehérjére. A fehérjék megkötik az antitesteket, és a maradék oldatot átengedik az oszlopon, majd a fehérjéket egy másik oldat segítségével felszabadítják és összegyűjtik. Ehhez magasan képzett szakemberre van szükség, hogy folyamatosan figyelje az oszlopot, és megbizonyosodjon arról, hogy a folyamat pontosan a tervek szerint halad.