Ábrázolja a termékkoncentráció és az idő függvényében az enzimatikus vizsgálat első kémcsövéből származó adatok diagramját. Megjegyzés: a vízszintes tengelynek "időnek", a függőleges tengelynek "termékkoncentrációnak" kell lennie.
Számítsa ki az 1. szakasz 1. lépésében ábrázolt adatpontok lineáris regressziós vonalát. Míg az Excel és a grafikus számológépek könnyen meghatározhatják ezt a lineáris modellt, levezethetjük a regresszió becslését vonal meredekségét úgy, hogy elosztjuk a szomszédos adatpontok közötti termékkoncentráció különbségét időbeli különbségükkel.
Jegyezzük fel a lineáris regressziós vonal meredekségét az 1. szakasz 2. lépéséből "kezdeti reakciósebességként (Vo)". Megjegyzés: a "[termékkoncentráció] = m [idő] + b" regressziós egyenes modellben az "m" együttható lejtő.
Ismételje meg az 1., 2. és 3. lépést a vizsgálat többi kémcsövével.
Ábrázoljuk az egyes kémcsövek szubsztrátkoncentrációjának inverzét a kezdeti reakciósebesség fordítottjával szemben (az 1. szakasz 4. lépése alapján). Például, ha a kezdeti sebesség egy olyan kémcsőhöz, amelynek kezdeti szubsztrátkoncentrációja 50 mikromol (uM) 80 uM / s volt, az inverzek a szubsztrátkoncentráció esetében 1/50 uM, a kezdeti értéknél pedig 1/80 uM voltak. sebesség. Megjegyzés: az inverz hordozó koncentrációjának a vízszintes tengelyen kell lennie, a fordított kezdeti sebességnek pedig a függőleges tengelyen kell lennie.
Megjegyzés: a hordozó koncentrációjának a vízszintes tengelyen kell lennie, a kezdeti reakciósebességnek pedig a függőleges tengelyen kell lennie.
Határozza meg a 2. szakasz 1. lépésében ábrázolt diagram lineáris regressziós vonalát. Megjegyzés: mivel ismernie kell a regressziós egyenes y metszését, a pontokat innen kell beírnia A 2. szakasz 1. lépése az Excelbe vagy a grafikus számológépbe, és használja a beépített regressziós modellezést funkcionalitás.
Osszuk el az 1-et az y metszéspontjával a lineáris regressziós vonaltól. Ez megadja a Vmax inverz értékét, az enzim maximális reakciósebességét. Megjegyzés: ha a lineáris regressziós modell "[Inverse Vo] = m [Inverse Substrate Conc.] + B" formában van, akkor a "b" értéke az y metszéspontja lesz. Osszuk el az 1-et "b" -vel a Vmax inverzének kiszámításához.
A Vmax tényleges értékének kiszámításához osszuk el az 1-et a 2. szakasz 3. lépésének eredményével.
Határozza meg az enzim koncentrációját az eredeti vizsgálatban (lásd a nyers adatokat). Megjegyzés: az enzimkoncentráció minden kémcsőben azonos; csak a szubsztrát koncentrációja változik a vizsgálatban.
Osszuk el a Vmax-ot (a 2. szakasz 4. lépésétől) az enzimkoncentrációval (a 2. szakasz 5. lépésétől). Az eredmény a Kcat értéke.
A chicagói székhelyű copywriter, Andy Pasquesi nagy tapasztalattal rendelkezik az autóipar (BMW, MINI Cooper, Harley-Davidson), a pénzügyi szolgáltatások (Ivy Funds, William Blair, T.) írásában. Rowe Price, CME Group), egészségügyi (Abbott) és fogyasztási cikkek (Sony, Motorola, Knoll) ügyfelek. Angol szakon szerzett diplomát a Harvard Egyetemen, de nem törődik az oxfordi vesszővel.