Ranije nevidljivo područje otkriveno je početkom 1600-ih izgradnjom prvih složenih mikroskopa što je dovelo do velikih revizija u znanstvenom razumijevanju. Osnovni složeni mikroskopi danas su standardna oprema u medicini i prirodnim znanostima. Propuštena vidljiva svjetlost sjaji kroz tanke preparate za povećanje. Prijenosni i skenirajući elektronski mikroskopi razvijali su se od 1931. nadalje. Za gledanje uzoraka ne koriste optičku svjetlost, već zrake elektrona i magnetska polja. Uglavnom za institucionalna istraživanja, priprema uzoraka zahtijeva složenu skupu opremu.
Razumijevanje složenih mikroskopa
Postoji nekoliko specijaliziranih vrsta složenih mikroskopa, ali najčešći su mikroskopi sa svijetlim poljem. Uzorci za njih trebali bi biti samo nekoliko mikrona, što je debela milijunti dio metra. Deblji primjerci ne propuštaju dovoljno svjetlosti i ne dopuštaju precizno fokusiranje. Mikroskopi svijetlog polja imaju dno s objektivnim lećama, najbližim uzorku, i očnu leću ili okular na vrhu. Nekoliko objektivnih leća različitog povećanja vrti se na nosnjaku ili kupoli. Stupanj odmah ispod naočala za nošenje drži klizač uzorka, a ispod njega izvor svjetlosti kroz kondenzator svijetli do uzorka. Suvremeni složeni mikroskopi mogu povećati objekt od 1.000 do 2.000 puta veće od njegovih izvornih dimenzija.
Cijeli planine
Za male predmete poput dlačica, malih insekata, dijelova insekata ili peludnih zrnaca, uzorak se stavlja izravno na središnji dio staklo za staklo ili plastiku za mikroskop s malom količinom medija za ugradnju, obično trajni proizvod od sintetičke ili prirodne smole dijapozitiva. Za privremene tobogane, kao što je kap vode u ribnjaku koja sadrži mikroorganizme, voda je medij za montiranje. Zaštitite uzorke pokrivačem, okruglim ili četvrtastim vrlo tankim komadom stakla ili plastike. Neki uzorci trebaju bojanje prirodnim ili sintetičkim bojama namijenjenim mikroskopiji kako bi se dobro vidjeli.
Tikvice i razmazi
Jednostavan način pripreme tankog uzorka je zgnječiti ili poravnati mali komadić tkiva ispod pokrova. Često se koristi u biljnim uzorcima kako bi se vidjeli kromosomi, brzorastuća tkiva poput vrhova korijena ili prašnika podvrgnute diobi stanice čuvaju se u fiksatoru, a zatim omekšaju i oboje kako bi se otkrilo kromosomi. Laganim pritiskom gumice s kraja olovke usredotočene na presvučeni uzorak prisiljava stanice da se razdvoje u jedan sloj. U razmazima, uzorak se tanko razmaže po jednom predmetnom staklu, koristeći drugi dijapozitiv kao posip, a rezultirajući namaz se osuši i oboji. U medicini se mažu uzorci tjelesnih tekućina, poput krvi, cerebro-spinalne tekućine ili sjemena.
Odjeljci obojenih tkiva
Kompliciraniji postupak rezanja događa se kada treba proučiti strukturu i organizaciju cijelog malog organizma ili dijela tkiva. Za većinu uzoraka prvo se tkivo sačuva i stvrdne, a voda ukloni. Zatim se uzorak ugradi u kruti medij poput voska ili plastike i izreže na vrlo tanke dijelove debljine samo nekoliko mikrona pomoću preciznog stroja koji se naziva mikrotom. Uzorak je orijentiran na rezanje ili uzdužne presjeke. Odjeljci se nalijepe na stakalce mikroskopa, ukloni podloga za ugradnju i tkiva oboje da razlikuju strukture i stanice. Tamo gdje je brzina bitna, poput kirurške biopsije raka, uzorci se zamrzavaju, narezuju zamrzavajućim mikrotomom, boje i ispituju.