Napravite grafikon koncentracije proizvoda u odnosu na vrijeme za podatke iz prve epruvete enzimatskog ispitivanja. Napomena: vodoravna os treba biti "vrijeme", a vertikalna os "koncentracija proizvoda".
Izračunajte liniju linearne regresije za podatkovne točke koje ste iscrtali u odjeljku 1, korak 1. Iako Excel i grafički kalkulatori mogu lako odrediti ovaj linearni model, možete izvesti procjenu regresije nagib linije dijeljenjem razlike u koncentraciji proizvoda između susjednih točaka podataka njihovom razlikom u vremenu.
Zabilježite nagib linearne regresijske linije iz odjeljka 1., korak 2. kao "početnu brzinu reakcije (Vo)". Napomena: u modelu regresijske linije "[koncentracija proizvoda] = m [vrijeme] + b", koeficijent "m" je nagib.
Ponovite korake 1, 2 i 3 za ostatak epruveta u ispitivanju.
Nacrtajte inverznu koncentraciju supstrata za svaku epruvetu nasuprot inverzne njegove početne brzine reakcije (iz odjeljka 1, korak 4). Na primjer, ako je početna brzina za epruvetu s početnom koncentracijom supstrata 50 mikromolara (uM) bio je 80 uM / s, inverzi bi bili 1/50 uM za koncentraciju supstrata i 1/80 uM / s za početnu brzina. Napomena: inverzna koncentracija supstrata trebala bi biti na vodoravnoj osi, a inverzna početna brzina trebala bi biti na vertikalnoj osi.
Napomena: koncentracija supstrata trebala bi biti na vodoravnoj osi, a početna brzina reakcije trebala bi biti na vertikalnoj osi.
Odredite liniju linearne regresije za grafikon koji ste iscrtali u odjeljku 2, korak 1. Napomena: jer ćete morati znati y-presjek za regresijsku liniju, točke biste trebali unijeti iz Odjeljak 2, korak 1 u Excel ili u grafički kalkulator i koristite ugrađeno regresijsko modeliranje funkcionalnost.
Podijelite 1 y-presjekom od linije linearne regresije. To će vam dati vrijednost inverzne Vmax, maksimalne brzine reakcije enzima. Napomena: ako model linearne regresije poprimi oblik "[Inverse Vo] = m [Inverse Substrate Conc.] + B", tada bi vrijednost "b" bila y-presjek. Podijelite 1 s "b" za izračunavanje inverzne vrijednosti Vmax.
Podijelite 1 rezultatom iz odjeljka 2, korak 3 da biste izračunali stvarnu vrijednost Vmax.
Odredite koncentraciju enzima u izvornom pokusu (pogledajte sirove podatke). Napomena: koncentracija enzima je jednaka za sve epruvete; samo se koncentracije supstrata razlikuju u ispitivanju.
Podijelite Vmax (iz odjeljka 2, korak 4) s koncentracijom enzima (iz odjeljka 2, korak 5). Rezultat je vrijednost Kcat.
Andy Pasquesi, copywriter sa sjedištem u Chicagu, ima bogato iskustvo u pisanju automobila (BMW, MINI Cooper, Harley-Davidson), financijskih usluga (Ivy Funds, William Blair, T. Rowe Price, CME Group), klijenti zdravstvene zaštite (Abbott) i robe široke potrošnje (Sony, Motorola, Knoll). Diplomirao je engleski jezik na Sveučilištu Harvard, ali ne mari za oxfordski zarez.