माइक्रोस्कोप के तहत देखने के लिए नमूना कैसे तैयार किया जाता है?

1600 के दशक की शुरुआत में एक पूर्व अदृश्य क्षेत्र का पता चला था, पहले यौगिक सूक्ष्मदर्शी के निर्माण से वैज्ञानिक समझ में बड़े संशोधन हुए। बुनियादी यौगिक सूक्ष्मदर्शी अब चिकित्सा और प्राकृतिक विज्ञान में मानक उपकरण हैं। प्रसारित दृश्य प्रकाश आवर्धन के लिए पतली तैयारी के माध्यम से चमकता है। 1931 के बाद से ट्रांसमिशन और स्कैनिंग इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप विकसित हुए। वे ऑप्टिकल प्रकाश का उपयोग नहीं करते हैं, लेकिन नमूने देखने के लिए इलेक्ट्रॉनों और चुंबकीय क्षेत्रों के बीम का उपयोग करते हैं। मुख्य रूप से संस्थागत अनुसंधान के लिए, नमूना तैयार करने के लिए जटिल, महंगे उपकरण की आवश्यकता होती है।

कई विशिष्ट प्रकार के यौगिक सूक्ष्मदर्शी मौजूद हैं, लेकिन उज्ज्वल क्षेत्र सूक्ष्मदर्शी सबसे आम हैं। उनके लिए नमूने केवल कई माइक्रोन होने चाहिए, जो एक मीटर का दस लाखवाँ हिस्सा मोटा होता है। मोटे नमूने पर्याप्त प्रकाश नहीं जाने देते हैं और सटीक ध्यान केंद्रित करने की अनुमति नहीं देते हैं। उज्ज्वल क्षेत्र सूक्ष्मदर्शी में नीचे की ओर वस्तुनिष्ठ लेंस वाली एक ट्यूब होती है, जो नमूने के सबसे करीब होती है, और शीर्ष पर एक ऑक्यूलर लेंस या ऐपिस होती है। विभिन्न आवर्धन के कई उद्देश्य लेंस एक नोजपीस, या बुर्ज पर घूमते हैं। नोजपीस के ठीक नीचे का चरण नमूना स्लाइड रखता है, और उसके नीचे प्रकाश का एक स्रोत एक कंडेनसर के माध्यम से नमूना तक चमकता है। आधुनिक यौगिक सूक्ष्मदर्शी किसी वस्तु को उसके मूल आयामों से 1,000 से 2,000 गुना तक बढ़ा सकते हैं।

बाल, छोटे कीड़े, कीट भागों या परागकणों जैसी छोटी वस्तुओं के लिए, नमूना सीधे एक के केंद्र भाग पर रखा जाता है। बढ़ते माध्यम की एक छोटी मात्रा के साथ कांच या प्लास्टिक माइक्रोस्कोप स्लाइड, आमतौर पर स्थायी के लिए सिंथेटिक या प्राकृतिक राल उत्पाद स्लाइड अस्थायी स्लाइड के लिए, जैसे तालाब के पानी की एक बूंद जिसमें सूक्ष्मजीव होते हैं, पानी बढ़ते माध्यम है। एक कवर पर्ची, कांच या प्लास्टिक के एक गोल या चौकोर बहुत पतले टुकड़े के साथ नमूनों को सुरक्षित रखें। कुछ नमूनों को अच्छी तरह से देखने के लिए माइक्रोस्कोपी के लिए बने प्राकृतिक या सिंथेटिक रंगों से रंगने की आवश्यकता होती है।

एक पतला नमूना तैयार करने का एक सरल तरीका है कवर स्लिप के नीचे ऊतक के एक छोटे टुकड़े को कुचलना या समतल करना। अक्सर पौधों के नमूनों में गुणसूत्रों को देखने के लिए उपयोग किया जाता है, तेजी से बढ़ने वाले ऊतक जैसे कि जड़ की युक्तियाँ या परागकोश चल रहे कोशिका विभाजन को फिक्सेटिव में संरक्षित किया जाता है, फिर उसे प्रकट करने के लिए नरम और दागदार किया जाता है गुणसूत्र। कवर-स्लिप्ड नमूने पर केंद्रित पेंसिल के इरेज़र सिरे से हल्का दबाव कोशिकाओं को एक परत में अलग कर देता है। स्मीयर में, स्प्रेडर के रूप में दूसरी स्लाइड का उपयोग करके नमूना को एक स्लाइड में पतला फैलाया जाता है, और परिणामी स्मीयर सूख जाता है और दागदार हो जाता है। चिकित्सा में, शारीरिक तरल पदार्थ, जैसे रक्त, मस्तिष्कमेरु-रीढ़ द्रव या वीर्य के नमूने लिए जाते हैं।

एक अधिक जटिल सेक्शनिंग प्रक्रिया तब होती है जब एक पूरे छोटे जीव या ऊतक के टुकड़े की संरचना और संगठन को अध्ययन की आवश्यकता होती है। अधिकांश नमूनों के लिए, पहले ऊतक को संरक्षित और कठोर किया जाता है और पानी को हटा दिया जाता है। फिर नमूना एक कठोर माध्यम जैसे मोम या प्लास्टिक में एम्बेडेड होता है और बहुत पतले वर्गों में कटा हुआ होता है, जिसे माइक्रोटोम नामक एक सटीक मशीन का उपयोग करके केवल कई माइक्रोन मोटा होता है। नमूना कटा हुआ होने पर क्रॉस-सेक्शन या अनुदैर्ध्य खंड देने के लिए उन्मुख है। वर्गों का पालन माइक्रोस्कोप स्लाइड्स पर किया जाता है, एम्बेडिंग माध्यम को हटा दिया जाता है, और ऊतकों को संरचनाओं और कोशिकाओं में अंतर करने के लिए दाग दिया जाता है। जहां गति आवश्यक है, जैसे कि कैंसर के लिए सर्जिकल बायोप्सी में, नमूने जमे हुए होते हैं, एक फ्रीजिंग माइक्रोटोम के साथ कटा हुआ, दाग और जांच की जाती है।