जेल वैद्युतकणसंचलन कैसे पढ़ें

जेल वैद्युतकणसंचलन एक विधि है जिसका उपयोग प्रयोगशालाओं में अलग करने के लिए किया जाता है डीएनए (डिऑक्सीराइबोन्यूक्लिक अम्ल)। इसका उपयोग आरएनए और प्रोटीन को अलग करने के लिए भी किया जा सकता है।

जेल वैद्युतकणसंचलन परिणाम पढ़ना शोधकर्ताओं को एक नमूने में किस्में के आकार को निर्धारित करने की अनुमति देता है। यह समझने के लिए कि प्रक्रिया कैसे काम करती है, पहले व्यक्ति को जेल वैद्युतकणसंचलन की परिभाषा सीखनी चाहिए।

जेल वैद्युतकणसंचलन एक शक्तिशाली उपकरण है जिसका उपयोग किया जाता है आणविक जीव विज्ञान डीएनए, आरएनए और प्रोटीन के आकार और विद्युत आवेश को निर्धारित करने के लिए। आप डीएनए के उन टुकड़ों का उपयोग करके शुरू करते हैं जो डीएनए के एक बड़े स्ट्रैंड से एंजाइमों द्वारा पचाए गए थे।

अपने परिणामों के रूप में जेल वैद्युतकणसंचलन बैंड की तीव्रता का उपयोग करके, आप यह पता लगा सकते हैं कि टुकड़ों का आकार क्या है। एक तो प्राप्त कर सकते हैं a डीएनए फिंगरप्रिंट.

जैसा कि शब्द के "इलेक्ट्रो" भाग से पता चलता है, a जेल वैद्युतकणसंचलन परिभाषा विद्युत क्षेत्र का उपयोग शामिल है। एक विशेष मशीन का उपयोग किया जाता है जिसमें एक बफर समाधान होता है जो इलेक्ट्रोड को कवर करता है, जेल को अंदर निलंबित करने के लिए एक कुआं और स्वयं इलेक्ट्रोड।

जेल वैद्युतकणसंचलन आम तौर पर अगरोस नामक समुद्री शैवाल से अगर के शुद्ध संस्करण से बने स्लैब में बने जेल के उपयोग की आवश्यकता होती है।

अगारोज जैल एक झरझरा मैट्रिक्स बनाते हैं जिसके माध्यम से विभिन्न आकारों के आवेशित अणु विभिन्न गति से यात्रा कर सकते हैं। मोल्ड में डालने से पहले जेल के घोल में एथिडियम ब्रोमाइड (EtBr) नामक एक रसायन मिलाया जाता है।

यदि आपके पास अलग करने के लिए बहुत छोटे डीएनए या प्रोटीन अणु हैं, तो आपको उपयोग करने की आवश्यकता हो सकती है a पॉलीएक्रिलामाइड जेल agarose के बजाय। पॉलीएक्रिलामाइड का उपयोग करते समय ध्यान रखें, क्योंकि यह न्यूरोटॉक्सिक है।

एक विशेष कंघी को agarose gel के सांचे में रखा जाता है, और फिर जमने के बाद सावधानी से हटा दिया जाता है। यह वह जगह है जहां डीएनए टुकड़ा या अन्य आणविक नमूने रखे जाते हैं, जिन्हें पहले एक विशेष लोडिंग डाई के साथ मिलाया जाता है। लोडिंग डाई यह केवल डीएनए की गति को ट्रैक करने के लिए है, क्योंकि यह अन्यथा दिखाई नहीं देता है।

यहाँ एक कुआँ भी है जिसमें वह है जिसे a. कहा जाता है डीएनए सीढ़ी या मार्कर। यह अध्ययन किए जा रहे डीएनए नमूनों के आकार की तुलना के लिए ज्ञात बैंड आकारों के साथ एक उच्च गुणवत्ता वाले टेम्पलेट के रूप में कार्य करता है। एक बार विद्युत क्षेत्र लागू हो जाने के बाद, ये नकारात्मक रूप से चार्ज किए गए अणु जेल के माध्यम से सकारात्मक छोर की ओर यात्रा करेंगे।

एक बार जब अणु जेल के अंत तक चले जाते हैं, तो यह पढ़ने का समय होता है जेल वैद्युतकणसंचलन परिणाम. जेल में EtBr डाई आसानी से डीएनए से जुड़ जाती है, इसलिए इसका उपयोग होता है, और फिर आप यूवी प्रकाश के तहत डीएनए फ्लोरोसेंट के बैंड देख सकते हैं।

आपको इस बात का बहुत ध्यान रखना चाहिए कि एथिडियम ब्रोमाइड को न छूएं, क्योंकि डीएनए के लिए इसकी आत्मीयता का मतलब यह भी है कि यह इसे खोल सकता है; इसलिए इसे एक उत्परिवर्तजन माना जाता है। नए, सुरक्षित रंग अब उपलब्ध हैं, हालांकि उनके मूल्य बिंदु अधिक हैं।

यूवी प्रकाश डीएनए या अन्य आणविक नमूनों की जेल वैद्युतकणसंचलन बैंड की तीव्रता को प्रकट करता है। एक जेल पर बैंड के स्थान के आकार का पता चलता है डीएनए टुकड़ा. जेल वैद्युतकणसंचलन बैंड तीव्रता अणु की सांद्रता को प्रकट करता है।

अब आप अपने नमूनों में डीएनए के बैंड की तुलना डीएनए सीढ़ी के नमूने से कर सकते हैं। सीढ़ी के ज्ञात बैंड आकार आपको उस डीएनए के सापेक्ष आकार को निर्धारित करने में मदद करेंगे जिसका आप अध्ययन कर रहे हैं।

जेल वैद्युतकणसंचलन का उपयोग किया गया है डीएनए फिंगरप्रिंटिंग और फोरेंसिक. इसने शोधकर्ताओं को कई प्रजातियों के जीनोम के बारे में जानकारी निर्धारित करने में मदद की है। इन महत्वपूर्ण क्षेत्रों के लिए उच्च गुणवत्ता वाले जेल वैद्युतकणसंचलन परिणामों का उपयोग करना आवश्यक है।

इसलिए उच्च गुणवत्ता वाली सामग्री के साथ काम करना और जैल बनाने में बहुत सावधानी बरतना महत्वपूर्ण है। आरएनए या प्रोटीन के साथ डीएनए नमूनों के संदूषण को रोकने के लिए यह आवश्यक है।

साफ बफर का उपयोग करना सुनिश्चित करें, जेल को सावधानी से डालें ताकि कंघी के कुएं समान रूप से बन जाएं और सभी अभिकर्मकों को उचित तापमान पर रखें। जेल वैद्युतकणसंचलन बैंड की तीव्रता जीवंत और स्वच्छ होनी चाहिए, पृष्ठभूमि में अन्य डीएनए का कोई निशान नहीं होना चाहिए, और जेल को प्रदूषित करने वाले आरएनए या प्रोटीन का कोई धब्बा नहीं होना चाहिए।