एक स्ट्रीक प्लेट के लिए अलगाव तकनीक

हालाँकि उन्हें नंगी आँखों से नहीं देखा जा सकता है, बैक्टीरिया हर जगह हैं। वे हमारे घरों के भीतर भोजन, मिट्टी, पानी, सतहों और हमारे शरीर में मौजूद हैं। बैक्टीरिया आमतौर पर मिश्रित आबादी में मौजूद होते हैं। किसी दिए गए नमूने में अन्य जीवाणु प्रजातियों से एक विशिष्ट जीवाणु का अलगाव सूक्ष्म जीवविज्ञानी को इसकी संरचना और कार्य, इसकी पहचान में उपयोग की जाने वाली विशेषताओं का अध्ययन करने की अनुमति देता है। माइक्रोबायोलॉजिस्ट अक्सर कई स्ट्रीक प्लेट तकनीकों में से एक का उपयोग करके बैक्टीरिया को अलग करते हैं।

उपकरण

सूक्ष्मजीवों को स्थानांतरित करने के लिए एक इनोकुलेटिंग लूप का उपयोग किया जाता है। इसमें एक नाइक्रोम या प्लेटिनम तार होता है जिसके एक सिरे पर एक छोटा, गोलाकार लूप होता है। दूसरा सिरा सीधा है और एक हैंडल में स्लाइड करता है। प्लास्टिक डिस्पोजेबल इनोकुलेटिंग लूप भी उपलब्ध हैं। बैक्टीरिया तभी अलग हो सकते हैं जब वे बढ़ते हैं। माइक्रोबायोलॉजिस्ट स्ट्रीक प्लेट अलगाव के लिए एक ठोस माध्यम से भरे उथले, गोल पेट्री डिश में बैक्टीरिया विकसित करते हैं, जिसे अगर कहा जाता है। आगर उस वातावरण की नकल करता है जिसमें बैक्टीरिया स्वाभाविक रूप से बढ़ते हैं। अवांछित जीवों के विकास को रोकने के लिए मीडिया से भरे व्यंजन बाँझ और ढक्कन वाले होते हैं। स्ट्रीक प्लेट आइसोलेशन के दौरान, बुन्सेन बर्नर की लौ में इनोकुलेटिंग लूप को बार-बार स्टरलाइज़ किया जाता है।

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सिद्धांत

सूक्ष्मजीवों के मिश्रण वाले नमूने से विशिष्ट जीवाणुओं को अलग करने के लिए स्ट्रीक प्लेट तकनीक सबसे लोकप्रिय तरीका है। तकनीक अनिवार्य रूप से जीवों की संख्या को कम करती है और उनके घनत्व को कम करती है। यह माइक्रोबायोलॉजिस्ट को अलग-अलग बैक्टीरियल कॉलोनियों को अलग करने और अलग करने की अनुमति देता है। एक कॉलोनी बैक्टीरिया का एक दृश्य समूह है। एक ही कॉलोनी के सभी जीवाणु एक ही जीवाणु कोशिका से उत्पन्न होते हैं। नतीजतन, व्यक्तिगत उपनिवेश "शुद्ध" उपनिवेश हैं। एक प्रकार के बैक्टीरिया से युक्त शुद्ध संस्कृति का उत्पादन करने के लिए शुद्ध कॉलोनी को दूसरी प्लेट में स्थानांतरित किया जाता है।

प्रक्रिया

जब ठीक से किया जाता है, तो स्ट्रीक प्लेट आइसोलेशन एक नमूने को पतला कर देता है और अलग-अलग जीवाणु कोशिकाओं को पृथक कॉलोनियों में विकसित करने में सक्षम बनाता है। एक माइक्रोबायोलॉजिस्ट एक लौ में इनोकुलेटिंग लूप को स्टरलाइज़ करके शुरू करता है। वह लूप को आगर से छूकर ठंडा करती है, फिर लूप को नमूने में डुबाती है और प्लेट के एक हिस्से को ढकने के लिए इसे आगे-पीछे फैलाती है। वह लूप को स्टरलाइज़ करती है, ठंडा करती है, और खींचकर प्लेट के दूसरे, आसन्न भाग को टीका लगाती है पहले खंड के माध्यम से कई बार लूप और एक ज़िगज़ैग का उपयोग करके दूसरे खंड को कवर करना गति। यह पहले खंड से कम संख्या में जीवाणुओं को उठाता है और उन्हें दूसरे खंड में स्थानांतरित करता है। इस मूल प्रक्रिया को जितनी बार दोहराया जाता है, यह इस्तेमाल की जाने वाली स्ट्रीक प्लेट विधि पर निर्भर करता है। विधि के बावजूद, मूल नमूने का उपयोग केवल प्लेट के पहले खंड को टीका लगाने के लिए किया जाता है।

स्ट्रीक प्लेट विधि

स्ट्रीक प्लेट विधियाँ स्ट्रीक किए गए अग्र वर्गों की संख्या के अनुसार भिन्न होती हैं। टी-स्ट्रीक विधि तीन खंडों का उपयोग करती है: ऊपरी आधा और दो समान आकार के निचले खंड। प्रारंभिक इनोकुलम को प्लेट के शीर्ष आधे भाग में रखा जाता है। जीवाणुओं को ऊपर के भाग से नीचे के किसी एक भाग में खींचा जाता है, फिर उस निचले भाग से दूसरे भाग में खींचा जाता है। चतुर्भुज विधि में, समान आकार के चार वर्गों को स्ट्रीक किया जाता है। निरंतर स्ट्रीकिंग विधि में आम तौर पर प्लेट के शीर्ष आधे हिस्से को 180 डिग्री घुमाते हुए टीका लगाना शामिल होता है, और लूप को स्टरलाइज़ किए बिना या पिछले से बैक्टीरिया को खींचे बिना प्लेट के दूसरे आधे हिस्से में टीका लगाना अनुभाग।

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