तरल पोषक तत्व शोरबा का उपयोग बैक्टीरिया जैसे एस्चेरिचिया कोलाई के लिए किया जाता है। इस शोरबा के लिए व्यंजन बैक्टीरिया की प्रजातियों और आनुवंशिक संशोधनों की उपस्थिति के आधार पर भिन्न होते हैं, जैसे, एंटीबायोटिक प्रतिरोध। अगर को जोड़कर शोरबा को मजबूत किया जा सकता है, जो बैक्टीरिया को अलग-अलग कॉलोनियां बनाने में सक्षम बनाता है, जबकि तरल संस्कृति में वे पूरी मात्रा में फैलते हैं। यह जीन क्लोनिंग या सूक्ष्मजीवविज्ञानी परख जैसे उन्नत तरीकों के लिए एक बुनियादी लेकिन आवश्यक तकनीक है। यह लेख मानता है कि मानक प्रयोगशाला एस्चेरिचिया कोलाई उपभेदों को लुरिया शोरबा (एलबी) अगर प्लेट्स (या पेट्री डिश) पर सुसंस्कृत किया जाना है।
१० ग्राम बैक्टीरियल-ग्रेड ट्रिप्टोन, ५ ग्राम यीस्ट एक्सट्रेक्ट, ५ ग्राम सोडियम क्लोराइड, १५ ग्राम अगर या agarose, और १ मिली लीटर सोडियम हाइड्रॉक्साइड का वजन करें। 1 लीटर माध्यम प्राप्त होने तक इन्हें आसुत और ऑटोक्लेव्ड बाँझ पानी की मात्रा के साथ मिलाएं। मीडिया को 25 मिनट के लिए ढीले-ढाले बोतलों या फ्लास्क में आटोक्लेव करें। अभिकर्मकों को जोड़ने से पहले लगभग 50 डिग्री सेल्सियस तक ठंडा होने दें, जो उच्च गर्मी पर नष्ट हो जाएंगे, जैसे कि एंटीबायोटिक्स या अन्य पोषक तत्व।
ऑटोक्लेव्ड मीडिया को ५० डिग्री सेल्सियस तक ठंडा होने दें और ४५ डिग्री सेल्सियस से कम नहीं होने दें, क्योंकि आगर डालने से पहले उसके कंटेनर में सेट हो जाएगा। बाँझ पेट्री डिश प्राप्त करें और प्लेट के पूरे सतह क्षेत्र और इसकी गहराई के कम से कम आधे हिस्से को कवर करने के लिए पर्याप्त डालें। प्लेटों को भरने से बचें और अधिमानतः अगर को डिश के ऊपरी किनारे से संपर्क करने की अनुमति न दें। प्लेटों को एक बाँझ वातावरण में जमने दें (उदाहरण के लिए एक लामिना का प्रवाह हुड के तहत) ढक्कन को बंद करके और हुड के एक कोने में छोड़ दें।
प्लेटों को सुखाएं। यद्यपि प्लेटों को सेट होते ही उपयोग किया जा सकता है, आगर की सतह पर कुछ नमी मौजूद होगी, जो बैक्टीरिया कालोनियों को पर्याप्त रूप से पालन करने से रोकेगी। इसलिए, किसी भी बैक्टीरिया को लगाने से पहले प्लेटों को सुखाना सबसे अच्छा है, उदाहरण के लिए उन्हें बाहर बैठने के लिए छोड़ देना कमरे का तापमान कुछ दिनों के लिए या आधे घंटे के लिए लैमिनार फ्लो हुड के नीचे या 37 डिग्री सेल्सियस में इनक्यूबेटर
प्लेटों को स्टोर करें। सूखे प्लेटों को उनके ढक्कनों पर उल्टा (उल्टा) ढेर किया जाना चाहिए और उनके मूल में वापस आना चाहिए पैकेजिंग, टेप बंद और या तो प्रकाश से बचाने के लिए या उपयुक्त में पन्नी में लपेटा गया कंटेनर। हमेशा प्लेटों पर तैयारी की तारीख लिखें और अगर प्लेटें 2 महीने से अधिक पुरानी हैं तो इसका उपयोग करने से बचें।
संदर्भ
- "मॉलीक्यूलर जीवविज्ञान में वर्तमान प्रोटोकाल"; करेन एल्बिंग और रोजर ब्रेंट; 2002
टिप्स
- उपरोक्त चरणों में से अधिक से अधिक (अधिमानतः सभी) एक बाँझ वातावरण के भीतर (उदाहरण के लिए एक under के तहत) को पूरा करें खुली लौ, या एक लामिना का प्रवाह हुड) हवाई जीवाणु संदूषकों को प्रवेश करने और बढ़ने से रोकने के लिए मीडिया।
लेखक के बारे में
Palmer Owyoung ने सैन डिएगो में कैलिफ़ोर्निया विश्वविद्यालय से अंतर्राष्ट्रीय व्यापार में मास्टर ऑफ़ आर्ट्स प्राप्त किया है और a सांता बारबरा में कैलिफोर्निया विश्वविद्यालय से समाजशास्त्र में कला स्नातक और एक प्रशिक्षित आणविक है जीवविज्ञानी वे 2006 से स्वतंत्र लेखक हैं। लेखन के अलावा, वह एक पूर्णकालिक विदेशी मुद्रा व्यापारी और इंटरनेट बाज़ारिया है।
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