उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी (एचपीएलसी) एक प्रयोगशाला तकनीक है जिसका उपयोग यौगिकों को अलग करने और पहचानने के लिए किया जाता है। यह एक प्रकार का कॉलम क्रोमैटोग्राफी है जो यौगिकों के विभिन्न ध्रुवों पर निर्भर करता है ताकि उन्हें अलग किया जा सके। एचपीएलसी मानक कॉलम क्रोमैटोग्राफी से अलग है क्योंकि यह कॉलम के माध्यम से समाधान को और अधिक तेज़ी से बल देने के लिए दबाव का उपयोग करता है, और इसलिए तेज़, और कभी-कभी अधिक सटीक, परिणाम उत्पन्न करता है। लक्ष्य कॉलम में यौगिकों को अलग करना और उन्हें अलग से बाहर निकालना है।
एचपीएलसी की गति और यौगिकों के विभिन्न ध्रुवों पर निर्भर होने के कारण, दो यौगिकों के साथ समान संरचना और ध्रुवताएं क्रोमैटोग्राफी तंत्र से एक ही समय या लगभग समान से बाहर निकल सकती हैं समय। इसे सहसंयोजन के रूप में जाना जाता है। मिश्रण यह निर्धारित करता है कि मिश्रण का कौन सा भाग किस बिंदु पर कठिन है।
एचपीएलसी आमतौर पर विभिन्न सामग्रियों से बने मोतियों से भरे ग्लास कॉलम का उपयोग करता है। स्तंभ के माध्यम से मजबूर किए जाने वाले मिश्रण में ऐसे रसायन होते हैं जो मोतियों को अलग-अलग ताकत से बांधते हैं। बंधन की ताकत, जो ध्रुवीयता में समानता पर निर्भर करती है, यह निर्धारित करती है कि जारी होने से पहले रसायन कितने समय तक मनका से बंधेगा। कुछ यौगिक इतनी मजबूती से बंधते हैं कि वे अनिवार्य रूप से कॉलम में मोतियों से कभी नहीं निकलते हैं और कभी भी कॉलम से बाहर निकलने वाले घोल में नहीं मापा जाता है।
विशिष्ट प्रयोगशाला पृथक्करण तकनीकों में एक परख, या पृथक्करण की विधि विकसित करना और फिर उस परख को एक समाधान से अलग-अलग यौगिकों को अलग करना शामिल है। हालांकि यह आमतौर पर कई समाधानों में परिणत होता है जिन्हें प्रक्रियाओं से गुजरना पड़ता है, जिससे जटिलता में तेजी से वृद्धि होती है। हालांकि एचपीएलसी अक्सर इस प्रक्रिया को सरल और तेज कर सकता है, एचपीएलसी उपकरण विकसित करने की लागत जबरदस्त हो सकती है। एचपीएलसी उपकरण विकसित करना, हालांकि बहुत अधिक कुशल है, यौगिकों को अलग करने के लिए अन्य परख विकसित करने की तुलना में बहुत अधिक महंगा है। यह इसे कई छोटे निजी स्वामित्व वाली प्रयोगशालाओं के लिए आर्थिक रूप से व्यवहार्य नहीं बनाता है।
एचपीएलसी का उपयोग न केवल सरल यौगिकों को अलग करने के लिए किया जाता है, इसका उपयोग विशिष्ट प्रोटीन को सेलुलर मिश्रण से अलग करने के लिए भी किया जाता है। इस मामले में कॉलम में मोतियों को आमतौर पर उस प्रोटीन के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी के साथ लेपित किया जाता है जिसे आपको इकट्ठा करने की आवश्यकता होती है। प्रोटीन एंटीबॉडी को बांधते हैं और शेष घोल को कॉलम से गुजारा जाता है, फिर प्रोटीन को दूसरे घोल का उपयोग करके छोड़ा जाता है और एकत्र किया जाता है। इसके लिए हर समय कॉलम की निगरानी करने के लिए एक उच्च कुशल तकनीशियन की आवश्यकता होती है और यह सुनिश्चित करता है कि प्रक्रिया बिल्कुल योजना के अनुसार चल रही है।