एंजाइम गतिविधि पर पीएच के प्रभाव का परीक्षण करते समय क्या भिन्न होता है?

जब आप एंजाइम गतिविधि पर पीएच के प्रभाव का परीक्षण करते हैं, तो आपको पीएच में बदलाव करना चाहिए। हालाँकि, आप इसे अच्छे या बुरे तरीकों से कर सकते हैं। ध्यान रखें कि अलग-अलग पीएच के प्रभावों को कौन से अतिरिक्त कारक भ्रमित कर सकते हैं। अन्यथा, प्राप्त परिणाम पीएच में परिवर्तन के कारण नहीं, बल्कि किसी अन्य कारक के कारण हो सकते हैं। पीएच को ठीक से कैसे बदलना है और प्रयोग के पीएच को कौन से कारक भ्रमित करते हैं, यह जानने से आपको अच्छे परिणाम प्राप्त करने और यह समझने में मदद मिलेगी कि आपके परिणाम ठीक वैसा नहीं हो सकता जैसा आपने उम्मीद की थी।

एंजाइम गतिविधि पर पीएच के प्रभाव का परीक्षण करते समय, अन्य कारकों को स्थिर रखते हुए केवल पीएच में परिवर्तन करें। इन अन्य कारकों में एंजाइम एकाग्रता, सब्सट्रेट एकाग्रता और तापमान शामिल हैं। स्थिर रहने वाले कारकों को नियंत्रण चर कहा जाता है। नियंत्रण चर आपको यह निष्कर्ष निकालने की अनुमति देते हैं कि आपके प्रयोग में प्राप्त एंजाइम गतिविधि के परिणाम पीएच के परिवर्तन, स्वतंत्र चर के कारण हैं। किसी प्रयोग में किन कारकों को नहीं बदलना है, यह जानना उतना ही महत्वपूर्ण है जितना कि यह जानना कि किस कारक को बदलना है, अन्यथा यह निष्कर्ष निकालना मुश्किल होगा कि क्या परिणाम वास्तव में एक चीज के कारण हैं जो था परीक्षण किया।

किसी अम्ल या क्षार की विभिन्न मात्राओं को पानी में घोलकर घोल का pH बदला जा सकता है। एंजाइम गतिविधि पर पीएच के प्रभाव का परीक्षण करने का एक तरीका है धीरे-धीरे एक मजबूत एसिड या एक मजबूत आधार की बूंदों को जोड़ना उस घोल में प्रवेश करें जिसमें एंजाइम होता है, और फिर उस बिंदु का निरीक्षण करें जिस पर एंजाइम गतिविधि धीमी हो जाती है या रुक जाता है। एक एसिड को एक यौगिक के रूप में परिभाषित किया जाता है जो एक हाइड्रोजन आयन दान करता है, जिसे प्रोटॉन (एच +) कहा जाता है, और एक आधार को एक यौगिक के रूप में परिभाषित किया जाता है जो हाइड्रॉक्साइड आयन (-ओएच) दान करता है। अलग-अलग एसिड और बेस में अलग-अलग संख्या में प्रोटॉन या हाइड्रॉक्साइड आयन होते हैं। किसी अम्ल या क्षार को घोल में मिलाने पर सभी प्रोटॉन या हाइड्रॉक्साइड आयन तुरंत दान नहीं किए जाते हैं, लेकिन दान किए गए प्रोटॉन या हाइड्रॉक्साइड आयनों की संख्या अलग-अलग दरों पर पीएच को बदल देती है। इस प्रकार, केवल एक प्रकार के एसिड या एक प्रकार के आधार का उपयोग करके एक एंजाइम प्रयोग में पीएच को बदलना एक अच्छा विचार है। अन्यथा, अन्य चर अनजाने में जोड़े जाते हैं।

एंजाइम गतिविधि का अध्ययन करने वाले कुछ प्रयोगशाला प्रयोगों में कोशिकाओं से एंजाइमों को मुक्त करने के लिए ताजा ऊतक को पीसना और फिर एंजाइम गतिविधि को मापने के लिए सब्सट्रेट जोड़ना शामिल है। ताजा ऊतक में रक्त होता है। रक्त में एंजाइम की उपस्थिति के कारण जो कार्बन डाइऑक्साइड गैस को रक्त में कार्बोनिक एसिड में बदल देता है, ऊतक स्वयं पीएच को प्रभावित कर सकता है। इस प्रकार, ताजा ऊतक में एंजाइम गतिविधि वाले प्रयोगों में, ऊतक को पीसने से पहले ठंडे पानी के बीकर में रक्त को धोना सहायक होता है। यह ऊतक के कारण पीएच के अनपेक्षित परिवर्तन को कम करेगा, ताकि पीएच में उद्देश्यपूर्ण परिवर्तन का अध्ययन किया जा सके।

जैसा कि ऊपर चर्चा की गई है, एंजाइम एकाग्रता एक नियंत्रण कारक है जिसे एंजाइम गतिविधि पर पीएच के प्रभाव का परीक्षण करते समय भिन्न नहीं होना चाहिए। हालांकि, प्रयोगात्मक प्रक्रियाएं अभी भी सूक्ष्म तरीकों से एंजाइम एकाग्रता को स्वाभाविक रूप से बदलती हैं। यदि कोई एन्जाइमों के शुद्ध विलयन का प्रयोग कर रहा है तो एन्जाइम सान्द्रता को स्थिर रखते हुए हालांकि, ऐसे प्रयोगों में जिनमें एंजाइम ताजा ऊतक से होता है, जैसे आलू के टुकड़े, पौधों के टुकड़े, या यकृत के टुकड़े, टुकड़ों का आकार प्रत्येक टेस्ट ट्यूब में एंजाइम की मात्रा को बदलता है। इस प्रकार, ऊतक के टुकड़ों को यथासंभव समान रूप से काटने में मदद मिलेगी। यह जानने का एक और उदाहरण है कि क्या नहीं बदलना है, और पूरी तरह से बदलाव से बचना मुश्किल क्यों है, यह जानने में मदद करता है कि पीएच जैसे कारक को अलग करने के परिणामों की व्याख्या कैसे की जाती है।