Au cours de la chromatographie sur couche mince, un technicien place des taches d'un mélange chimique sur une plaque plate recouverte d'une couche de matériau absorbant, puis place la partie inférieure de la plaque dans du solvant. Au fur et à mesure que le solvant monte sur la plaque, les produits chimiques du mélange montent avec lui à des vitesses différentes, de sorte qu'ils se séparent. Ce test détermine quels produits chimiques sont dans un mélange en comparant les vitesses de déplacement des inconnues aux normes connues. Cependant, les résultats peuvent être affectés par de nombreux facteurs.
TL; DR (trop long; n'a pas lu)
Les valeurs du facteur de rétention en chromatographie sur couche mince sont affectées par l'absorbant, le solvant, la plaque de chromatographie elle-même, la technique d'application et la température du solvant et de la plaque.
Facteurs de rétention
Le facteur de rétention d'un produit chimique pendant la chromatographie sur couche mince est une mesure de la distance à laquelle il se déplace vers le haut de la plaque en réponse au mouvement du solvant. Étant donné que le mouvement absolu du produit chimique dépend de la distance parcourue par le solvant, vous calculez les valeurs du facteur de rétention par rapport au degré de mouvement du solvant. Le facteur de rétention d'un produit chimique est la distance verticale parcourue par le produit chimique à partir de l'endroit où il a été appliqué à l'origine sur la plaque, divisé par la distance parcourue par le solvant — mesurée à partir du même point de départ point.
Plaque de chromatographie en couche mince
La plaque de chromatographie en couche mince elle-même peut affecter la valeur du facteur de rétention obtenue pour un produit chimique donné. Les plaques de chromatographie en couche mince peuvent être revêtues d'une variété de solides absorbants; le plus souvent de la silice ou de l'alumine. Étant donné que le facteur de rétention est basé sur l'affinité relative du produit chimique pour l'absorbant par rapport au solvant, le changement d'absorbant peut modifier considérablement le facteur de rétention. De plus, l'épaisseur et l'uniformité de la couche d'absorbant peuvent varier d'une plaque à l'autre, surtout si elles sont faites à la main. Ces facteurs peuvent également modifier la valeur du facteur de rétention pour les produits chimiques.
Facteurs de rétention des impacts des solvants
Étant donné que le solvant transporte le produit chimique vers le haut de la plaque, le solvant particulier utilisé aura également un impact substantiel sur la valeur du facteur de rétention du produit chimique. Un solvant qui a une interaction plus forte pour un produit chimique particulier surmontera plus facilement tout affinité du produit chimique pour la couche absorbante, et déplacer ce produit chimique plus loin dans une période donnée de temps. Les mélanges de solvants peuvent également avoir des effets différents selon la proportion de chaque solvant.
Autres facteurs
Il existe quelques autres facteurs qui peuvent affecter le facteur de rétention dans certains cas. La température du solvant et de la plaque peut apporter de légers changements, car, par exemple, le solvant peut souvent mieux dissoudre les produits chimiques qu'il transporte à des températures plus élevées. La technique du technicien en appliquant l'échantillon sur la plaque peut également modifier le facteur de rétention. L'application d'une trop grande quantité d'échantillon peut entraîner le déplacement de larges bandes diffuses de produit chimique vers le haut de la plaque, ce qui rend difficile la mesure précise de la distance sur laquelle le produit chimique a été transporté.