Lorsque vous passez d'une puissance faible à une puissance élevée sur un microscope, la lentille de l'objectif à haute puissance se déplace directement sur l'échantillon et la lentille de l'objectif à faible puissance s'éloigne de l'échantillon. Ce changement modifie le grossissement d'un spécimen, l'intensité lumineuse, la zone du champ de vision, la profondeur de champ, la distance de travail et la résolution. L'image doit rester nette si les objectifs sont de haute qualité.
Changement de grossissement
Le passage d'une puissance faible à une puissance élevée augmente le grossissement d'un échantillon. La quantité de grossissement d'une image est égale au grossissement de la lentille oculaire, ou oculaire, multiplié par le grossissement de la lentille de l'objectif. Habituellement, la lentille oculaire a un grossissement de 10x. Un microscope optique standard de qualité laboratoire aura généralement quatre lentilles d'objectif, allant d'une faible puissance de 4x à une puissance élevée de 100x. Avec une puissance oculaire de 10x, cela donne au microscope optique standard une plage de grossissement global de 40x à 1000x.
L'intensité lumineuse diminue
L'intensité lumineuse diminue à mesure que le grossissement augmente. Il y a une quantité fixe de lumière par zone, et lorsque vous augmentez le grossissement d'une zone, vous regardez une zone plus petite. Vous voyez donc moins de lumière et l'image apparaît plus sombre. La luminosité de l'image est inversement proportionnelle au grossissement au carré. Avec un grossissement multiplié par quatre, l'image sera 16 fois plus sombre.
Champ de vision
Passer à une puissance élevée sur un microscope diminue la zone du champ de vision. Le champ de vision est inversement proportionnel au grossissement de l'objectif. Par exemple, si le diamètre de votre champ de vision est de 1,78 millimètre sous un grossissement de 10x, un objectif de 40x sera un quart de sa largeur, soit environ 0,45 millimètre. Le spécimen apparaît plus grand avec un grossissement plus élevé car une zone plus petite de l'objet est étalée pour couvrir le champ de vision de votre œil.
Profondeur de champ
La profondeur de champ est une mesure de l'épaisseur d'un plan focal. Au fur et à mesure que le grossissement augmente, la profondeur de champ diminue. À faible grossissement, vous pourrez peut-être voir tout le volume d'une paramécie, par exemple, mais lorsque vous augmentez le grossissement, vous ne pourrez peut-être voir qu'une seule surface du protozoaire.
Distance de travail
La distance de travail est la distance entre l'échantillon et l'objectif. La distance de travail diminue à mesure que vous augmentez le grossissement. L'objectif à haute puissance doit être beaucoup plus proche de l'échantillon que l'objectif à faible puissance pour faire la mise au point. La distance de travail est inversement proportionnelle au grossissement.
Immersion dans l'huile
Les microscopes amplifient l'apparence d'un objet en courbant la lumière. Un grossissement plus élevé signifie que la lumière est plus courbée. À un certain point, la lumière est tellement courbée qu'elle ne peut pas traverser la lentille de l'objectif. À ce stade – généralement environ 100x pour les microscopes de laboratoire standard – vous devrez mettre une goutte d'huile entre votre échantillon et l'objectif. L'huile "déplie" la lumière pour allonger la distance de travail et permettre des images à fort grossissement.