Kuinka laskea solupitoisuus

Tutkijoiden ja teknikoiden on usein laskettava solujen pitoisuus suspensiossa. Esimerkiksi kun potilas saa verensa lääkärin vastaanotolla, laboratorio voi käyttää tiettyjä menetelmiä etsimään valkosolujen määrää tietyssä verimäärässä. Tämä antaa lääkärille paljon tietoa potilaan terveydestä, erityisesti hänen immuunijärjestelmästään ja siitä, taisteleeko hän infektiota vai muuta sairautta. Tällaiset testit voivat etsiä monia muita verisoluja, selkäydinnesteitä ja muita ruumiinnesteitä, kuten siittiösolumääriä siemennesteessä hedelmällisyystarkoituksiin. Tutkijat laskevat myös bakteerien, hiivojen ja muiden mikro-organismien solupitoisuudet moniin tarkoituksiin aina ekologisesta tutkimuksesta teolliseen tekniikkaan. Yksi yleisimmistä tekniikoista opetetaan myös monissa yliopistobiologian luokissa, ja se käyttää laitetta, jota kutsutaan laskukammioon.

Ennen kuin solususpensio voi mennä laskemiskammioon, se saattaa tarvita laimennusta, koska se voi sisältää tuhansia tai miljoonia soluja. Siinä tapauksessa soluja ei voida kohtuudella laskea. Näytteen laimentamiseksi laita steriilillä pipetillä kymmenen mikrolitraa soluliuosta koeputkeen, joka sisältää 90 mikrolitraa laimenninta. Laimennusaineen tyyppi riippuu solutyypistä. Sekoita se hyvin. Tämä liuos on nyt kymmenen kertaa laimennettu kuin alkuperäisnäyte, joten sen laimennuskerroin on 10

instagram story viewer
-1. Merkitse se. Toista tämä useita kertoja steriilillä pipetillä joka kerta, kunnes liuos on riittävän laimea. Jos laimennat sitä toisen kerran, toinen koeputki laimennettiin 100 kertaa enemmän kuin alkuperäinen liuos, joten laimennuskerroin oli 10-2 ja niin edelleen.

Saatat joutua kokeilemaan useita laimennuksia oikean laimennuskertoimen määrittämiseksi laskentakammioon. Laskukammio on pohjimmiltaan hyvin pieni, selkeä, suorakaiteen muotoinen laatikko, jonka syvyys ja tarkka ristikko on merkitty yläosaan. Sitä kutsutaan myös hemosytometriksi tai joskus hemasytometriksi. Tavoitteena on, että suspensio on riittävän laimea niin, että kun sitä tarkastellaan laskukammiossa, mikään solu ei ole päällekkäinen ja ne jakautuvat koko ristikkoon tasaisesti. Pipetoi laimennettu suspensio, joka sisältää solut, laskukammion kuoppaan, jossa se laskeutuu ritiläkammioon kapillaarivaikutuksen kautta. Aseta laskukammio mikroskoopin vaiheelle ja katsele sitä pienellä teholla.

Ruudukko sisältää neliöitä, jotka on tehty vielä pienemmistä neliöistä. Valitse noin neljä tai viisi neliötä tai kuinka monta tahansa sinun on laskettava vähintään 100 solua valitsemallesi kuviolle, kuten neljä kulmaa ja keskiruutu. Jos solut ovat suuria, nämä voivat olla suuria neliöitä, mutta jos solut ovat pieniä, voit valita pienemmät neliöt.

Kunkin ruudukon neliömäärä voi vaihdella laskukammion valmistajan mukaan, mutta kammion syvyys on usein 0,1 millimetreinä, suurten neliöiden pinta-ala on 1 neliömetri ja pienempien neliöiden ala on 0,04 neliömetriä millimetriä. Suurempien neliöiden tilavuus on sitten 0,1 kuutiometriä. Oletetaan, että tässä esimerkissä olet laskenut yhteensä 103 solua viidessä neliössä ja että laimensit alkuperäisen näytteen, kunnes laimennuskerroin oli 10-2.

Jos jokaisen ruudukon neliön tilavuus on 0,1 kuutiometriä ja viisi laskettiin, lasketun kammion kokonaistilavuus oli 0,5 kuutiometriä ja soluja oli 103. Kaksinkertaistamalla siitä yksi kuutiometri tekisi siitä 206 solua. Yksi kuutiosenttimetri vastaa yhtä millilitraa, mikä on hyödyllinen mitta nesteille. Kuutiosenttimetrissä on 1000 kuutiometriä. Siksi, jos suspensiota olisi ollut kuutiosenttimetriä tai millilitraa, olisit laskenut 206 000 (206 x 1000) solua. Tältä näyttää yhtälö:

Ruudukon neliön tilavuus × laskettujen neliöiden lukumäärä = lasketun suspension kokonaismäärä

Solujen lukumäärä ÷ lasketun suspension tilavuus = solumäärä kuutiometriä kohti

Solumäärä millimetreinä kuutioina × 1000 = solujen määrä millilitrassa

Sinun on otettava huomioon kaikki tehdyt laimennukset, jotta alkuperäinen liuos voidaan laskea mikroskoopilla. Tässä esimerkissä laimennuskerroin on 10-2. Liuoksen alkupitoisuuden laskeminen:

Solumäärä millilitrassa ÷ laimennuskerroin = solupitoisuus

Tässä esimerkissä solujen määrä millilitrassa on 206 000 ja jakamalla se 10: llä-2 (0,01) antaa solupitoisuudeksi 20 600 000 solua millilitrassa alkuperäisessä näytteessä.

Teachs.ru
  • Jaa
instagram viewer