Tärkein syy värjätä näyte ennen sen asettamista mikroskoopin alle on saada siitä parempi käsitys, mutta värjäys tekee paljon muutakin kuin vain korostaa solujen ääriviivoja. Jotkut tahrat voivat tunkeutua soluseiniin ja korostaa solukomponentteja, ja tämä voi auttaa tutkijoita visualisoimaan aineenvaihduntaprosesseja. Tahrat auttavat myös erottamaan elävät solut kuolleista. Lisäksi värjäys antaa tutkijoille mahdollisuuden laskea tietyntyyppisten solujen määrä tietyssä biomassassa. Erilaisia tahroja on 20 tai enemmän, ja jokaisella on oma tarkoituksensa.
TL; DR (liian pitkä; Ei lukenut)
Värjäyksen päätarkoitus on korostaa soluja ja solujen osia. Yli 20 erilaista tahraa on olemassa, ja käyttämäsi tahran tyyppi riippuu siitä, mitä etsit.
Tahrojen tyypit
Tahran valinta riippuu siitä, mitä etsit. Kaikki tahrat eivät sovi eläville soluille, mutta ne, jotka sisältävät Bismarck-ruskean, tolueenipunaisen, Niilinsinisen ja Niilipunaisen, sekä tietyt fluoresenssit, joita käytetään DNA: n korostamiseen. Jotkut tahrat korostavat itiöitä, jotkut havaitsevat lipidejä ja proteiineja, ja jotkut muuttavat väriä tärkkelysten läsnä ollessa. Tutkimuksen tarkoitus määrittää parhaan käytettävän tahran tyypin. Esimerkiksi lääkäri, joka suorittaa PAP-testin, käyttää Eosin Y: tä. Se on hapan fluoresoiva väriaine, joka muuttuu punaiseksi, kun se koskettaa punasoluja, sytoplasmaa ja solukalvoja. Sitä käytetään myös veriytimen testaamiseen.
Joissakin tapauksissa tutkija voi käyttää useampaa kuin yhtä tahraa. Esimerkiksi hematoksyliini on tahra, joka muuttaa solun ytimet siniseksi. Kun sitä käytetään yhdessä eosiinin kanssa, joka muuttaa solun muut osat punaiseksi tai vaaleanpunaiseksi, se antaa voimakkaamman kontrastin ja helpottaa ytimien erottamista. PAP-tahroja ja veriydinnäytteitä on helpompi tutkia, kun näitä kahta tahraa käytetään yhdessä.
Gram's tahra: Sairaalan työntekijät käyttävät Gramin tahraa tunnistamaan haitalliset bakteerit. Tämä on itse asiassa sarja väriaineita, joilla on erilaiset vaikutukset erityyppisiin bakteereihin ja jotka antavat lääkäreille tärkeän diagnostisen työkalun. Gramin tahra on kolmiosainen prosessi. Ensimmäiseen lisätään Huckerin kristallivioletti, joka värjää kaikki bakteerit yhtenäiseksi violetiksi. Seuraavassa vaiheessa lisätään jodivärjäystä, joka saa värin tarttumaan gram-positiivisiin soluihin, jotka ovat pääasiassa Staphylococcus ja Streptococcus. Tahra pestään pois, jolloin gram-positiivisille soluille jää selvästi violetti väri; sitten lisätään kolmas tahra, Safranine O, parantamaan kontrastia gramnegatiivisten bakteerien ja muun materiaalin välillä diassa.
Värjäysmenettely
Kun valmistelet näytettä dialle, voit kiinnittää sen kuivalla tai märällä, voit leikata sen ohueksi osaksi tai voit tahrata sen. Tahraa käytettäessä tavanomainen näyte on märkäasennus, mikä tarkoittaa vesipisaran asettamista lasille, näytteen asettamista veteen ja peittämistä peitelevyllä. Sitten levität tahraa dian kulmaan tiputtimella ja annat sen vetää näytettä kohti kapillaaritoiminnolla. Se auttaa asettamaan paperipyyhkeen dian vastakkaiselle puolelle veden houkuttelemiseksi. Kun tahra on levinnyt koko dialle, näyte on valmis tutkimiseen.