Eri yhdisteiden erottamiseksi ja tunnistamiseksi on monia menetelmiä. Kromatografia on tiede, jonka avulla voit erottaa seoksen komponentit. Rf (joskus epävirallisesti kirjoitettu "rf-arvoksi") on osa sitä.
Kromatografiaa on monia erilaisia. Tässä kohdistus on yksinkertaisin kromatografia: paperikromatografia tai ohutkerroskromatografia (TLC). Molemmat käyttävät samaa yleistä menettelytapaa, joka on kuvattu alla.
Mitä kromatografia sisältää?
Kaikissa kromatografiatyypeissä on a kiinteä vaihe ja a mobiilivaihe. Kiinteä vaihe, kuten saatat pystyä arvata nimen perusteella, ei liiku. Paperikromatografiassa kiinteä faasi on itse paperi.
Yhdisteiden erottamisen aloittamiseksi analysoitava aine pistetään paperikappaleen alareunaan. Sitten paperi asetetaan dekantterilasiin, joka sisältää liikkuvan faasin, joka on liuotin. Liuottimen tulisi olla sen pisteen alla, jossa analysoitava aine on pisteviiva. Sen ei pitäisi upottaa analyyttiä.
Neste liikkuu paperia ylöspäin kapillaarivaikutuksella. Jos analyytti tai sen osa kiinnittyy liikkuvaan vaiheeseen, se liikkuu sen mukana. Jos sillä on vahvempi vetovoima kiinteää vaihetta varten, se ei liiku.
Kun liuotin on siirtynyt jonkin verran ylöspäin kiinteässä faasissa, sinulla on kromatogrammi. Tämä kromatogrammi kertoo sinulle erilaisten komponenttien erottumisesta seoksessa tai kertoo mitä ainetta sinulla on. Miten?
Komponenttien erottaminen ja tunnistaminen kromatogrammin avulla
Jos kromatogrammin kehittämisen ehdot ovat samat, tietyn aineen liikkuvan etäisyyden tulisi muuttua. Tämä etäisyys mitataan retentiokertoimen kaava tai Rf.
Retentiotekijän kaava on:
Tämän arvon tulisi olla sama aineelle, kun kromatogrammi kehitetään samalla tavalla.
Tämä on hyödyllistä, kun sinulla on aineiden seos.
Oletetaan esimerkiksi, että sinulla on neljä näytettä: Kolme on standardia ja yksi seos. Sinun tehtäväsi on tunnistaa seoksessa olevat komponentit.
Mitkä ovat standardit? Standardit ovat puhdas näyte aineesta. Tämä voidaan suorittaa vertailuna kromatogrammilla.
Seosta voidaan käyttää, minkä jälkeen voit määrittää, kuinka pitkälle sen eri komponentit juoksevat.
Sano, että Standardilla # 1 on voimakas affiniteetti veteen (liikkuva faasi). Tämä tarkoittaa, että se kulkee paperin mukana liikkuvan vaiheen mukana. Toisaalta standardilla # 2 on voimakas affiniteetti paperia kohtaan. Tämä tarkoittaa, että se pysyy paikallaan. Viimeisenä, standardilla # 3 on affiniteetti sekä veteen että paperiin. Voit ennustaa, että se siirtää välimäärän.
Huomaa, että liuotin liikkuu 5,7 cm, kun Standard # 1 liikkuu 0,5 cm, Standard # 2 liikkuu 4,8 cm ja Standard # 3 2,9 cm. Mitkä ovat Rf arvot kullekin standardille?
Nyt tiedät R: nf standardien arvot. Seuraavaksi toiselle paperille asetat pisteen seosta ja annat kromatogrammin kehittyä asettamalla sen veteen.
Kun olet poistanut, huomaat, että on kaksi pistettä, jotka erosivat alkuperäisestä pisteestä. Tämä tarkoittaa todennäköisesti, että seoksessa on vain kaksi komponenttia. Seuraavaksi sinun on selvitettävä, mitä standardeja nämä kaksi komponenttia vastaavat. Tätä varten mitataan Rf arvot.
Liuotin liikkui 4,5 cm. Yksi komponentti (nimeltään komponentti 1) liikkui 2,2 cm ja toinen 3,9 cm (kutsutaan komponentiksi 2). Jos haluat nähdä, mitä standardia nämä komponentit vastaavat, sinun on käytettävä retentioaste kaavaa R: n laskemiseksif arvot.
Kun otetaan huomioon nämä Rf arvoja, on todennäköistä, että komponentti 1 vastaa standardia # 3, koska Rf arvot ovat hyvin samanlaisia. Komponentti 2 on todennäköisesti vakio # 2.