PH: n vaikutukset katekolioksidaasiin

Entsyymeillä on määritelty kolmiulotteinen rakenne. Kaikki muutokset tässä rakenteessa aiheuttavat muutoksia entsyymin aktiivisuudessa. Reaktioseoksen pH muuttaa tätä rakennetta ja siten myös aktiivisuutta. Jokaisella entsyymillä on optimaalinen pH, jossa se näyttää maksimaalisen aktiivisuuden. Merkittävät erot tästä pH: sta aiheuttavat muutoksia entsyymin kolmiulotteisessa rakenteessa, mikä vähentää sen aktiivisuutta. Katekolioksidaasientsyymin optimaalinen pH on noin 7.

Tietoja katekolioksidaasista

Katekoli hapetetaan katekolioksidaasilla hapen läsnä ollessa, jolloin muodostuu bentsokinoni, joka altistettaessa ilmalle muodostaa melaniinin. Tämä entsyymi tunnetaan myös muilla nimillä, kuten tyrosinaasi, difenolioksidaasi ja polyfenolioksidaasi. Perunat, omenat ja banaanit sisältävät katekolioksidaasia, joka vaikuttaa värittömään katekoliin ja muuttaa sen ruskeaksi melaniiniksi. Rusketus, joka tapahtuu, kun leikkaat ja altistat nämä esineet ilmalle, on seurausta tästä reaktiosta.

Katekolioksidaasin uutto

instagram story viewer

Katekolioksidaasi voidaan uuttaa banaaneista tai perunoista. Sekoita banaani kahdesti tilavuudella vettä laastissa. Vaihtoehtoisesti sekoita banaani veteen katekolioksidaasiuutteen saamiseksi. Suodata voimusliinin läpi ja säilytä jääkaapissa. Jos käytät perunoita, kuori ja pilkkaa ne ja sekoita sitten suurella nopeudella käyttämällä 700 ml kylmää, tislattua vettä. Suodata tämä perunamehu cheeseclothin läpi ja jäähdytä.

Kokeelliset yksityiskohdat

Valmista puskuriliuokset, joiden pH-arvot ovat 2, 4, 6, 7 ja 8. Merkitse viisi koeputkea näillä pH-arvoilla. Täytä kukin putki neljäsosaan vastaavalla puskurilla. Lisää 10 tippaa katekolioksidaasiuutetta kuhunkin näistä putkiin ja sen jälkeen 10 tippaa katekolia. Ravista putkia ja merkitse kunkin putken väri muistiin asteikolla 0-5, jossa 0 ei merkitse väriä ja 5 tarkoittaa tummaa, ruskeaa väriä. Ravista putkia edelleen ja huomaa väri viiden minuutin välein seuraavien 20 minuutin ajan.

Tuloksen tulkinta

Käytä saamiasi tietoja 20 minuutin lukemiseen kaavion piirtämiseen. Osoita X-akselilla puskurien pH. Ilmoita Y-akselilla värin voimakkuudet välillä 0-5. Merkitse jokaisen pH-arvon kohdalla värin voimakkuus ja yhdistä nämä merkinnät saadaksesi lopullisen käyrän. Paikanna tämän käyrän piikki ja määritä optimaalinen pH katekolioksidaasireaktiolle. Jos olet suorittanut kokeen oikein, optimaalinen pH-arvo on 7. PH: ssa 7 entsyymi on kaikkein aktiivisin ja katalysoi nopeasti katekolin hapettumisen, jolloin saadaan tumma, ruskea väri.

Varotoimenpiteet

Banaanit ja perunat sisältävät katekolia. Siksi on mahdollista, että osa tästä hapetetaan reaktion aikana, mikä vaikuttaa havaittuun väriintensiteettiin. Tämän reaktion estämiseksi pidä katekolioksidaasiuute jääpalalla ennen kuin lisäät sen kuhunkin putkeen. Katekoli on myrkyllistä, joten varmista, ettet anna sen koskettaa ihoasi. Älä pipetoi katekoliliuoksia, ja jos vuotaa, käytä käsineitä puhdistaaksesi se paperipyyhkeillä.

Teachs.ru
  • Jaa
instagram viewer