Mikrobioloogia on liiga väikeste organismide uurimine, et neid palja silmaga näha. Nende väike suurus tähendab, et te ei saa minna nende loomade uurimiseks loomaaeda ega võtta safarit; peate neid ise üles kasvatama. Alakultuurimine on üks mikrobioloogilistest võtetest, mis võimaldab teil neid korralikult kasvatada, viies mõned mikroobid ühest keskkonnast teise.
Mikroorganismide kasvatamine
Mikroorganismid on nagu iga teine organism. Nad söövad, hingavad, paljunevad, eritavad. Kui soovite kasvatada mikroorganisme, peate pakkuma keskkonna, kus nad saaksid kõiki neid tegevusi teha. Erinevalt oma kassile keskkonna pakkumisest on "maja" ja teie mikroorganismide "toit" sama - kasvukeskkond.
Mõni kasvukeskkond on vedel, teine pooltahke geel. Vedelaid kasvukeskkondi nimetatakse puljongideks ja geelitaolisi söötmeid agariteks. Puljongide ja agarite spetsiifilist koostist saab reguleerida nii, et see toetaks üldist mikroobide kasvu või optimeeriks konkreetse organismi kasvu.
Värske meedia
Mikroorganismid söövad ja erituvad samas kasvukeskkonnas. Nii võivad mikroobid muuta oma keskkonna nende kasvu toetamiseks vähem sobivaks. See on subkultuuri üks põhjus: viia mõned mikroorganismid vanalt, osaliselt saastunud keskkonnalt värskele uuele keskkonnale, kus on palju toitu ja jääkaineid. Seda tüüpi alakultiveerimine on lihtsalt rakuliini tervena hoidmine. Eemaldate olemasolevast rakupopulatsioonist väga väikese protsendi - alamproovi - ja panete need uude keskkonda, kus nad saavad areneda ja paljuneda.
Alamkultuur identifitseerimiseks
Paljud pärismaailma proovid sisaldavad mitut tüüpi mikroorganisme. Proovi kuuluvate organismide õigeks tuvastamiseks peate erinevad tüübid eraldama. Kujutage näiteks ette, et teil on puljong mitut tüüpi organismidega. Proovite puljongit tööriistaga, näiteks õhukese metallrõngaga, mida nimetatakse inokuleerimisaasaks. Seejärel viite proovist võetud mikroorganismid agari kasvukeskkonda. See on selle subkultuuriprotsessi esimene samm. Spetsiifilise tehnika abil saate levida mikroorganisme õhemalt, kui liigute üle kogu plaadi. Ideaalis levitaksite mikroorganisme nii õhukeselt, et nad moodustavad agariplaadil pisikesed, selgelt eristuvad kolooniad - igaüks pärineb ühest mikroorganismist.
Subkultuuride kasutamine
Kui olete loonud selgelt eristatavate kolooniatega agariplaadi, saate need uuesti subkultuurida - seekord proovid mikroobid ainult ühest kolooniast. Kui viiksite selle subkultuuri üle näiteks puljongisöötmele, jõuaksite puljongini, mis sisaldaks ainult ühte tüüpi organisme. Seejärel võiksite sellest konkreetsest organismist piisavalt kasvada, et teil oleks populatsiooni, mille peal saaksite teste teha. Kui subkultiveerite kõik erinevad mikroorganismide kolooniad, satuksite üksikute populatsioonide hulka igat tüüpi organism, mis on algproovis, ja teil on võimalus neid uurida detail.