Peamine põhjus, miks te isendi enne mikroskoobi alla panemist määrite, on selle parem vaatamine, kuid värvimine teeb palju enamat kui lihtsalt rakkude piirjoonte esiletoomine. Mõned plekid võivad tungida läbi rakuseinte ja esile tuua rakukomponente ning see võib aidata teadlastel ainevahetusprotsesse visualiseerida. Plekid aitavad eristada ka elusrakke surnud rakkudest. Pealegi võimaldab värvimine teadlastel loendada teatud tüüpi rakkude arvu teatud biomassis. Eksisteerib 20 või enam erinevat tüüpi plekke ja igal neist on oma eesmärk.
TL; DR (liiga pikk; Ei lugenud)
Värvimise peamine eesmärk on rakkude ja raku osade esiletoomine. Olemas on üle 20 erinevat tüüpi plekide ja kasutatava pleki tüüp sõltub otsitavast.
Plekkide tüübid
Pleki valik sõltub sellest, mida otsite. Kõik plekid ei sobi elusrakkudele, kuid need, mille hulka kuuluvad Bismarcki pruun, tolueenipunane, Niiluse sinine ja Niiluse punane ning teatud DNA fluorestsentsid, mida kasutatakse DNA esiletoomiseks. Mõni plekk tõstab esile eoseid, mõni tuvastab lipiide ja valke ning mõni muudab tärkliste juuresolekul värvi. Uuringu eesmärk määrab parima värvitüübi, mida kasutada. Näiteks PAP-määrimist teostav arst kasutaks Eosin Y-d. See on happeline fluorestseeruv värv, mis punaste vereliblede, tsütoplasma ja rakumembraanidega kokkupuutel muutub punaseks. Seda kasutatakse ka vereüdi testimiseks.
Mõnel juhul võib uurija kasutada rohkem kui ühte plekki. Näiteks hematoksüliin on plekk, mis muudab rakutuumad siniseks. Kui seda kasutatakse koos eosiiniga, mis muudab raku muud osad punaseks või roosaks, annab see tugevama kontrasti ja muudab tuumad kergemini eristatavaks. Neid kahte plekki koos kasutades on PAP-määrdeid ja verelüdiproove lihtsam uurida.
Grami plekk: Haiglatöötajad kasutavad Grami plekki kahjulike bakterite tuvastamiseks. See on tegelikult värvainete seeria, millel on erinevat tüüpi bakteritele erinev toime ja mis annavad arstidele olulise diagnostikavahendi. Grami plekk on kolmeosaline protsess. Esimesele lisatakse Huckeri kristallviolett, mis värvib kõiki baktereid ühtlase violetse värviga. Järgmises etapis lisatakse joodiplekk, mille tõttu värv kinnitub grampositiivsetele rakkudele, milleks on peamiselt Staphylococcus ja Streptococcus. Plekk pestakse, jättes grampositiivsetele rakkudele selge violetse värvi; seejärel lisatakse kolmas plekk Safraniin O, et suurendada kontrasti gramnegatiivsete bakterite ja slaidil oleva ülejäänud materjali vahel.
Värvimisprotseduur
Kui valmistate slaidile isendi, võite selle kuivalt või märjalt kinnitada, võite selle viilutada õhukeseks osaks või määrida. Peitsi kasutamisel on tavaline protseduur proovi märgmärgistamine, mis tähendab tilga vee asetamist objektiklaasile, proovi asetamist vette ja katmist katteloiguga. Seejärel kantakse plekk tilgutiga slaidi nurka ja lastakse sellel kapillaaride abil proovile tõmmata. Vee meelitamiseks aitab paberirätiku asetamine slaidi vastasküljele. Kui plekk on kogu slaidil levinud, on proov uurimiseks valmis.