Teadlased ja teadlased uurivad bakterite kasvu, valmistades kultuure laboris. Toitainete agarit sisaldavad Petri tassid kasvatavad bakterikultuure ühest pühkimisest või inokuleerimisest. Õpilased saavad valmistada toitainete agarit kodus, kasutades teadusmessi projekti jaoks toidukaupade või tervisetoodete kaupluste tarvikuid. Tavapärased köögiseadmed ja põhilised kööginõud pakuvad vahendeid steriilse söötme valmistamiseks, mida saab väljastada Petri tassidesse. Steriilse tehnika järgimine materjalide kuumutamisel ning pindade puhtana ja kuivana hoidmisel suurendab tulemusi, hoides ära hallituse ja osakeste kultuuri saastumise.
Asetage kohvifilter kurnasse ja riputage sõel läbipaistva kausi ava kohale.
Valage puljong aeglaselt filtrisse, veendudes, et puljong ei voolaks filtri külgedelt üle. Kui filter ummistub osakestega, eemaldage kasutatud filter, asendage see puhta filtriga ja jätkake puljongi valamist.
Eemaldage kurn ja filter kausi ülaosast ning jälgige, kas puljong näib puhas (st vedelikus ei ole hõljunud osakesi). Kui vedelikus hõljuvad osakesed, korrake punkte 1 ja 2 teise selge kausi ja värske kohvifiltri abil.
Asetage pott pliidile ja valage potti selge puljong.
Lisage puljongit sisaldavasse potti 16 untsi destilleeritud vett.
Lülitage pliit sisse ja reguleerige kuumus keskmiseks madalaks. Kuumuta puljong hauduma (st poti külje lähedale ilmuvad väikesed mullid).
Hautatavale puljongile (umbes 2,5 grammi) lisage 1 tl agar-agari pulbrit ja segage segu pulbri lahustumiseni. Segage pulber lahustumiseks kindlasti ja hoidke želatiin poti põhja (kus see võib kõrbeda) vajuda.
Korrake sammu 7, kuni kogu agar-agari pulber on puljongis lahustunud.
Jätkake puljongi segamist umbes 1 minut, et kogu pulber oleks täielikult lahustunud.
Lülitage pliit välja, asetage poti kaas ja laske vedelikul vähemalt 15 minutit jahtuda.
Paigaldage steriilsed Petri tassid hõlpsaks kokkupanekuks järjest, kuid ärge eemaldage kaane. Soovi korral asetage sooja potti hoidmiseks trivet. Kui kasutate petri tasside asemel kaanega vanillikreemi tasse, steriliseerige vanillikaste tassid, asetades tassid ja kaaned tagurpidi (tagurpidi) fooliumiga kaetud küpsisepaberil ja küpseta ahjus vähemalt üks tund 375 kraadi juures Fahrenheit. Enne kasutamist veenduge, et steriliseeritud tassid ja kaaned oleksid täielikult jahtunud.
Puudutage ettevaatlikult poti väliskülge, et kontrollida, kas see on katsudes soe, ja asetage pott trivet. Kui pott on katsumiseks liiga kuum, oodake vähemalt 10 minutit, et pott jahtuks.
Eemaldage kaas ja pange kõrvale. Asetage kulp potti.
Eemaldage ühelt Petri tassi kaas ja väljastage toitainepuljong, et tassi poolenisti täita. Katke anum kohe kaanega.
Korrake 14. sammu kõigi Petri tasside jaoks.
Lase toitainepuljongil segunemata Petri tassides taheneda vähemalt 1 tund.
Raputage petri nõusid ettevaatlikult küljelt küljele, et kontrollida, kas toitainete puljong on täielikult tahkestunud. Kui puljong pole täielikult tarretunud, oodake enne uuesti kontrollimist veel 20 minutit.
Steriilse tööpiirkonna loomiseks katke laud või tasane pind paberrätikute rulliga. Rebige paberrätiku leht lahti ja keerake see neli korda kokku, et tekiks paks ristkülikukujuline vatt. Pange see vat tööala ühte otsa.
Viige üks Petri tass steriilsesse tööpiirkonda ja eemaldage kaas. Pöörake anum ettevaatlikult ümber ja asetage üks ots volditud vati küljele, nii et see asetseks tagurpidi ja kergelt nurga all (paberrätikuvati juures on väike vahe).
Pöörake kaas ümber ja asetage see steriilsele tööpinnale Petri tassi kohale. Kui kaanel ilmuvad veepiisad, raputage see niiskus enne kaetud pinnale asetamist ettevaatlikult maha, kuid ärge puudutage kaane sisemust.
Korrake samme 19 ja 20 iga Petri tassi jaoks, asetades tagurpidi ühe tassi eelmise tassi küljele, mitte paberrätikuvatile. Nõud ilmuvad astmelise komplektina, mille ühel küljel on tühimikke, et liigne niiskus saaks aurustuda.
Vaadake ümberpööratud Petri tasse, et kontrollida, kas plaatide külgedel on niiskus aurustunud. Kui kogu niiskus on puhastatud, keerake plaadid paremale ülespoole ja katke kohe kasutamiseks kaaned.
Inokuleerige toiteagar plaadile, pühkides enne kaanega katmist toitainete agari pinnale soovitud kultuuri sisaldavat tampooni. Pöörake petri tass ümber, nii et tahke aine oleks peal. Hoidke inokuleeritud Petri tassi tahke aine peal kasvatamiseks ja kaanega põhjas niiskuse, lahtiste osakeste või kasvu püüdmiseks.
Asjad, mida vajate
- Kohvifiltrid
- Kurn
- 2 suurt, selget kaussi
- 16 oz. rasvavaba veiseliha puljong
- 16 oz. destilleeritud vesi
- Kaanega keedupott
- Pliit
- 10 grammi agaragarit
- Mõõtelusikas
- Segisti
- Paberrätikute rull
- Potihoidjad
- Metallist kulp
- Steriilsed petri nõud või läbipaistvad kaanega vanillikastmetassid
- Valikuline: taimer, trivet, ahi, pann, alumiiniumfoolium, pann
Näpunäited
Kui kaantel ilmub liigniiskust, kuivatage ja steriliseerige kaaned temperatuuril 375 Fahrenheiti kraadi vähemalt 1 tund (enne kaanesse panemist asetage kaaned kindlasti alumiiniumfooliumiga vooderdatud puhtale pannile ahi).
Hoiatused
-
Põletuste vältimiseks olge kuuma poti käsitsemisel ettevaatlik. Kui poti külg on liiga kuum, on potis olev vedelik väga kuum. Toitainepuljong peaks olema anumatesse jaotamiseks soe, kuid mitte liiga kuum, et jahutamisel ja tardumisel Petri tassides kondenseeruda.
Ärge puudutage Petri tassi sisemust (st plaati või kaant), et vältida soovimatute bakterite sattumist kultuuri.