Baktereid kasvatatakse Petri tassidel tahkel söötmel, mida nimetatakse bakteriagariks, kus moodustuvad kõrgendatud ümmargused kolooniad. Erinevalt üksikust bakterirakust on koloonia bakterirühm, mis on piisavalt suur, et olla palja silmaga nähtav. Bakterite kasvu saab mõõta kolooniate olemasolu lihtsa jälgimisega; kvantitatiivsemad meetodid hõlmavad siiski loenduskambri kasutamist või sagedamini elujõuliste plaatide loendamist. Viimast kasutatakse kõige sagedamini, kuna see annab ka kvalitatiivset teavet, näiteks erinevate kasvutingimuste mõju. Kuna Petri tassis võib olla miljardeid baktereid, tuleb kõigepealt mõõtmiseks proov lahjendada, nii et oleks võimalik lugeda kolooniate arvu.
Katseklaasis lisage 10 mikroliitrit algset bakterikultuuri 90 mikroliitrile lahjenduskeskkonnale. Sulgege tuubi kaas tihedalt ja keerutage ettevaatlikult, et saada homogeenne segu. Nüüd on proov kümnendik algsest kontsentratsioonist.
Viige 10 mikroliitrit seda uut proovi uude katseklaasi, mis sisaldab 90 mikroliitrit lahjenduskeskkonda, segage see uuesti. Taas on tulemuseks, et proovi lahjendatakse veelgi - nüüd on see sajandik selle algsest kontsentratsioonist. Korrake seda mitu korda, kuni algproov on lahjendatud 10 ° C vahel
4 ja 1010 korda. Veenduge, et iga toru oleks märgistatud õige lahjendusega, näiteks 10-1, 10-2 ja nii edasi.Pange 10 mikroliitrit viimasest lahjendusest agarplaadile. Jaotage bakterilahus laotusserva abil kogu agarplaadi pinnale. Korrake seda veel kahe plaadi jaoks. Samuti on tavaline, et need etapid tehakse võrdlemiseks teiste lahjendustasemetega. Märgistage plaatide põhjad kindlasti. Asetage iga plaadi kaaned tagasi ja laske agarplaatidel mitu minutit kuivada kas laboripingil leegi all või inkubaatoris. Pange plaadid inkubaatorisse, mis tuleks seada bakteritüve jaoks sobivale temperatuurile. Lase kasvada 12–16 tundi.
Kolooniad peaksid olema nähtavad 16 tunni pärast; mõned geneetilised modifikatsioonid võivad siiski vajada kauem (näiteks värvi arengut). Kui kolooniad on vaadeldavad, võtke plaadid välja ja leidke need, millel on 30 kuni 300 kolooniat. Pange püsimarkeriga punkt Petri tassi põhja - agariga küljele, mitte kaanele - kõikjal, kus agari kaudu on näha kolooniat. Loendage iga markeripunkt. Korrake seda iga roa kohta.
Selle katse lähtekultuuri bakterite hulga mõõtmiseks tuleb lahjendus arvutustes kahes kohas ümber pöörata. Esiteks, kui võtsite katseklaasist ühe mikroliitri Petri tassi sisestamiseks, võtsite ühe kümnendiku lahjendatud proovist, nii et selle tühistamiseks peate kõik korrutama kümnega. Lisaks, kui lahjendustegur katseklaasis oli näiteks 10-7, siis tuleb kolooniate arv korrutada 10-ga7 lahjendusefekti muutmiseks. Lihtsalt eemaldage arvutustes eksponendi negatiivne märk. Kasutage valemit:
[Loendatud kolooniate arv] × 10 × [kui mitu korda tuleb proov korrutada, et jõuda algse kontsentratsioonini: näiteks 105] = Kolooniaid moodustavate üksuste arv (CFU) milliliitri algkultuuri kohta. See on bakterite kasv teie petri tassides.