Puhverlahused peavad vastu pH muutustele, kuna need sisaldavad nõrku happe-aluse konjugaate, mis neutraliseerivad H + ja OH- ioone. Puhverlahused koosnevad nõrkadest hapetest või alustest ning selle happe või aluse soolast. Sobiva puhvrisüsteemi valik sõltub puhverdamise pH-vahemikust. Enamik bioloogilisi reaktsioone toimub pH vahemikus 6 kuni 8. Fosfaatpuhvrid puhverdatakse pH vahemikus 6,5 kuni 7,5. Karboksüülhappe puhvrid on kasulikud pH vahemikus 3 kuni 6. Boraatpuhvrid toimivad vahemikus pH 8,5 kuni 10. Aminohappe puhvrid, nagu glütsiin ja histidiin, toimivad pH vahemike mitmekesisuses. Tris-puhver on bioloogialaborites üks enimkasutatavaid puhvrisüsteeme. Tris-puhverlahuse arvutusi kasutatakse järgmises näites, kuid metoodikat kohaldatakse mis tahes puhverlahuse suhtes.
Vajaliku aluse moolide määramiseks kasutage lõpplahuse molaarsuse ja mahu korrutist. Näiteks kui on vaja 2 liitrit 0,1 M Tris-puhvri lahust, on vajalik Tris-i moolide arv:
Arvutage vajaliku puhvri mass, korrutades vajaliku moolide arvu aluse molekulmassiga. Näiteks võrdub 0,2 mooli Tris-aluse mass:
Lahustage alus destilleeritud vees, kasutades magnetilist segamisvarda ja segamisplaati. Lahustage see veekoguses, mis on vaid veidi väiksem kui lõplik lahuse maht (950 kuni 975 ml iga liitri lõpplahuse kohta). Tris-puhvri pH muutub koos kontsentratsiooniga ja vajab liiga väikest algmahu kasutamist. Samuti on parim puhver valmistada samal temperatuuril, mida kasutatakse testi või katse ajal, kuna Tris'il on suured temperatuurist sõltuvad pH muutused.
Näpunäited
- Puhverlahuse valmistamise aja kokkuhoiuks võite kasutada eelnevalt valmistatud puhverkontsentraate nõutava pH juures ja lahjendada soovitud molaarsuse ja mahu saavutamiseks. Valmistage puhverlahus samal temperatuuril, mida kasutatakse, et vältida olulisi pH muutusi. Vältige aeganõudvat pH reguleerimist, tiitrige alles pärast lahjendamist soovitud kontsentratsioonini. Liiga väikese koguse lahustamine viib korduvate tiitrimisteni.
Hoiatused
- Hapete ja aluste käsitsemisel olge ettevaatlik. Kandke kaitseprille.
Autori kohta
Carla Boulianne on koolituselt evolutsioonibioloog ja kirest vabakutseline kirjanik. Lisaks Demand Stuudios ja eHowis kirjutamisele on ta ka Suite101.com andekate laste vanemate kasvatamise kirjanik. Ta on põnevil uute teemade uurimisel läbi ulatuslike uuringute.
Foto autorid
Foto viisakalt Emmi P. @ morgueFile.com