Το Agar είναι μια ζελατινώδης ουσία που προέρχεται από τα καθαρισμένα κυτταρικά τοιχώματα των κόκκινων φυκών. Προστίθεται σε μικροβιολογικά μέσα, τα οποία είναι υλικά στα οποία αναπτύσσονται μικροοργανισμοί σε εργαστήρια, προκειμένου να παρέχουν περισσότερη στερεή δομή στην ουσία. Το Agar δεν έχει θρεπτική αξία, οπότε όταν οι επιστήμονες το χρησιμοποιούν για την καλλιέργεια μικροοργανισμών, προσθέτουν διάφορα θρεπτικά συστατικά για να αυξήσουν την ανάπτυξη βακτηριδίων σε τρυβλία Petri ή σε δοκιμαστικούς σωλήνες. Όταν οι ερευνητές αποθηκεύουν βακτήρια σε δοκιμαστικό σωλήνα, αναφέρεται ως κεκλιμένο άγαρ επειδή το υγρό μέσο ανάπτυξης στερεοποιείται ενώ ο σωλήνας βρίσκεται σε κεκλιμένη θέση. Ένα βιδωτό κάλυμμα στην κλίση αποτρέπει το στέγνωμα του άγαρ.
Το μέσο παρασκευάζεται διαφορετικά για slants από τα τρυβλία Petri. Η αποστείρωση γίνεται με το άγαρ στους σωλήνες. τα τρυβλία Petri προ-αποστειρώνονται προτού χυθεί αποστειρωμένο άγαρ. Μετρήστε την ποσότητα νερού που απαιτείται και τοποθετήστε την σε φιάλη Erlenmeyer. Ζεσταίνουμε τη σόμπα μέχρι να βράσει σχεδόν. Προσθέστε άλλα συστατικά αν χρειαστεί και ανακατέψτε το μείγμα αργά και συνεχώς μέχρι να διαλυθούν. Αυτά τα συστατικά μπορεί να περιλαμβάνουν εκχύλισμα βοείου κρέατος, πεπτόνη και ρυθμιστικά ρΗ, ανάλογα με τον τύπο του μικροοργανισμού που καλλιεργείται.
Πριν από την προσθήκη της αφυδατωμένης σκόνης άγαρ, ανακατέψτε την με μια μικρή ποσότητα κρύου αποσταγμένου νερού για να αποφύγετε τη συσσώρευση. Να είστε προσεκτικοί όταν προσθέτετε άγαρ στο ζεστό υγρό, καθώς μπορεί να αφρίζει και να ξεχειλίζει το δοχείο. Προσθέστε μικρές ποσότητες άγαρ κάθε φορά και ανακατέψτε για ομοιόμορφη κατανομή του άγαρ. Απενεργοποιήστε τη φωτιά όταν το μείγμα αρχίσει να ατμό, πριν βράσει.
Τοποθετήστε τους άκαμπτους δοκιμαστικούς σωλήνες σε ένα ράφι δοκιμαστικών σωλήνων. Γεμίστε τους δοκιμαστικούς σωλήνες μεταφέροντας περίπου 5 ml - περίπου 0,17 ουγκιές ή 1 κουταλάκι του γλυκού - του λιωμένου άγαρ από το δοχείο χρησιμοποιώντας μια αποστειρωμένη πιπέτα. Καλύψτε χαλαρά κάθε έναν από τους δοκιμαστικούς σωλήνες, επειδή το άγαρ δεν θα αποστειρωθεί εάν σφραγιστούν καλά. Αποστειρώστε όλους τους σωλήνες σε αυτόκλειστο για περίπου 25 λεπτά στους 121 βαθμούς Κελσίου ή 250 βαθμούς Φαρενάιτ.
Όταν το άγαρ είναι ακόμα ζεστό, γείρετε προσεκτικά τη σχάρα κρατώντας τους δοκιμαστικούς σωλήνες σε μια συμπαγή επιφάνεια ή α χοντρό βιβλίο, διασφαλίζοντας ότι το μέσο μέσα στους σωλήνες βρίσκεται σε κεκλιμένη θέση σε σχέση με τη δοκιμή σωλήνες. Αφήστε το μέσο να κρυώσει και στερεοποιηθεί σε αυτή τη γωνία, η οποία αυξάνει την επιφάνεια του άγαρ. Σφίξτε τα καπάκια των δοκιμαστικών σωλήνων αφού κρυώσει το άγαρ. Οι πλάκες είναι έτοιμες για χρήση μόλις το άγαρ στερεοποιηθεί. Μπορούν να αποθηκευτούν σε θερμοκρασία δωματίου ή στο ψυγείο για μελλοντική χρήση.
Εμβολιάστε το λοξό με μεταφορά κυττάρων με έναν βρόχο εμβολιασμού από έναν μικροοργανισμό μιας αποικίας πάνω σε μια πλάκα στην επιφάνεια του κεκλιμένου. Μετακινήστε το βρόχο κατά μήκος της επιφάνειας του κεκλιμένου και ξανακερδίστε τους σωλήνες. Επωάστε το κεκλιμένο έως ότου υπάρχουν ενδείξεις ανάπτυξης και, στη συνέχεια, τοποθετήστε το σωλήνα σε ψυγείο.
