Επιστήμονες και ερευνητές μελετούν την ανάπτυξη βακτηρίων προετοιμάζοντας καλλιέργειες σε εργαστήριο. Τα τρυβλία Petri που περιέχουν θρεπτικό άγαρ αναπτύσσουν βακτηριακές καλλιέργειες με ένα μόνο κτύπημα ή εμβολιασμό. Οι μαθητές μπορούν να προετοιμάσουν θρεπτικό άγαρ στο σπίτι χρησιμοποιώντας προμήθειες από παντοπωλεία ή καταστήματα υγιεινής διατροφής για ένα έργο επιστημονικής έκθεσης. Οι συμβατικές συσκευές κουζίνας και τα βασικά μαγειρικά σκεύη παρέχουν τα εργαλεία για την προετοιμασία ενός αποστειρωμένου καλλιεργητικού μέσου που μπορεί να διανέμεται σε τρυβλία Petri. Ακολουθώντας αποστειρωμένες τεχνικές με θέρμανση των υλικών και διατηρώντας τις επιφάνειες καθαρές και στεγνές θα βελτιώσει τα αποτελέσματα αποτρέποντας τη μόλυνση της καλλιέργειας από μούχλα και σωματίδια.
Τοποθετήστε ένα φίλτρο καφέ σε ένα σουρωτήρι και κρεμάστε το φίλτρο πάνω από το άνοιγμα του διαυγούς μπολ.
Αδειάστε αργά το ζωμό στο φίλτρο, βεβαιωθείτε ότι ο ζωμός δεν ξεχειλίζει από τις πλευρές του φίλτρου. Εάν το φίλτρο φράξει με σωματίδια, αφαιρέστε το χρησιμοποιημένο φίλτρο, αντικαταστήστε το με ένα καθαρό φίλτρο και συνεχίστε να ρίχνετε το ζωμό.
Αφαιρέστε το φίλτρο και το φίλτρο από την κορυφή του μπολ και παρατηρήστε εάν ο ζωμός φαίνεται διαυγής (δηλαδή, δεν υπάρχουν αιωρούμενα σωματίδια στο υγρό). Εάν τα σωματίδια επιπλέουν στο υγρό, επαναλάβετε τα βήματα 1 και 2 χρησιμοποιώντας ένα δεύτερο διαυγές μπολ και ένα φρέσκο φίλτρο καφέ.
Τοποθετήστε το δοχείο στη σόμπα και ρίξτε το διαυγές ζωμό στην κατσαρόλα.
Προσθέστε 16 ουγκιές αποσταγμένου νερού στην κατσαρόλα που περιέχει το ζωμό.
Ενεργοποιήστε τη σόμπα και ρυθμίστε τη θερμότητα σε μέτρια-χαμηλή. Ζεσταίνετε το ζωμό σε σιγοβράσιμο (δηλαδή, εμφανίζονται μικρές φυσαλίδες κοντά στο πλάι του δοχείου).
Προσθέστε 1 κουταλάκι του γλυκού σκόνη άγαρ-άγαρ στο σιγοβρασμένο ζωμό (περίπου 2,5 γραμμάρια) και αναδεύστε το μείγμα μέχρι να διαλυθεί η σκόνη. Βεβαιωθείτε ότι ανακατεύετε τη σκόνη για να διαλυθεί και αποτρέψετε τη βύθιση της ζελατίνης στο κάτω μέρος της κατσαρόλας (όπου μπορεί να καεί).
Επαναλάβετε το βήμα 7 έως ότου διαλυθεί όλη η σκόνη άγαρ-άγαρ στον ζωμό.
Συνεχίστε να ανακατεύετε το ζωμό για περίπου 1 λεπτό για να βεβαιωθείτε ότι όλη η σκόνη διαλύεται πλήρως.
Σβήστε τη σόμπα, τοποθετήστε το καπάκι στην κατσαρόλα και αφήστε το υγρό να κρυώσει για τουλάχιστον 15 λεπτά.
Τακτοποιήστε τα αποστειρωμένα τρυβλία Petri στη σειρά για εύκολη συναρμολόγηση, αλλά μην αφαιρείτε τα καπάκια. Εάν θέλετε, τοποθετήστε ένα trivet για να κρατήσετε το ζεστό δοχείο. Εάν χρησιμοποιείτε φλιτζάνια κρέμας αντί για πιάτα Petri, αποστειρώστε τα φλιτζάνια κρέμας τοποθετώντας τα φλιτζάνια και τα καπάκια ανεστραμμένο (ανάποδα) σε φύλλο μπισκότου που καλύπτεται με αλουμινόχαρτο και ψήνουμε στο φούρνο για τουλάχιστον μία ώρα στους 375 βαθμούς Θερμόμετρο Φαρενάιτ. Βεβαιωθείτε ότι τα αποστειρωμένα κύπελλα και τα καπάκια έχουν κρυώσει εντελώς πριν από τη χρήση.
Αγγίξτε προσεκτικά το εξωτερικό του δοχείου για να βεβαιωθείτε ότι είναι ζεστό στο άγγιγμα και τοποθετήστε το δοχείο στο trivet. Εάν το δοχείο είναι πολύ ζεστό για να το αγγίξετε, περιμένετε τουλάχιστον 10 λεπτά για να αφήσετε το δοχείο να κρυώσει.
Αφαιρέστε το καπάκι και αφήστε το στην άκρη. Τοποθετήστε την κουτάλα στην κατσαρόλα.
Αφαιρέστε το καπάκι από ένα τρυβλίο Petri και διανείμετε θρεπτικό ζωμό για να γεμίσετε το πιάτο στη μέση. Καλύψτε αμέσως το πιάτο με το κάλυμμα του.
Επαναλάβετε το βήμα 14 για καθένα από τα τρυβλία Petri.
Αφήστε το θρεπτικό ζωμό να στερεοποιηθεί στα τρυβλία Petri για τουλάχιστον 1 ώρα, ανενόχλητα.
Ανακινήστε απαλά τα τρυβλία Petri πλάι-πλάι για να ελέγξετε ότι ο θρεπτικός ζωμός έχει εντελώς στερεοποιηθεί. Εάν ο ζωμός δεν έχει πηκτωθεί εντελώς, περιμένετε άλλα 20 λεπτά πριν ελέγξετε ξανά.
Καλύψτε ένα τραπέζι ή μια επίπεδη επιφάνεια με ένα ρολό χαρτοπετσέτες για να δημιουργήσετε μια αποστειρωμένη περιοχή εργασίας. Κόψτε ένα φύλλο χαρτοπετσέτας και διπλώστε το τέσσερις φορές για να δημιουργήσετε ένα παχύ, ορθογώνιο πώμα. Τοποθετήστε αυτό το wad στο ένα άκρο της περιοχής εργασίας.
Μεταφέρετε ένα τρυβλίο Petri στην αποστειρωμένη περιοχή εργασίας και αφαιρέστε το καπάκι. Αναποδογυρίστε προσεκτικά το πιάτο και τοποθετήστε το ένα άκρο στο πλάι του διπλωμένου πώματος, έτσι ώστε να είναι ανεστραμμένο και ελαφρώς γωνιακό (με ένα μικρό κενό από το χαρτομάντιλο)
Γυρίστε το καπάκι και τοποθετήστε το πάνω από το τρυβλίο Petri στην αποστειρωμένη επιφάνεια εργασίας. Εάν εμφανιστούν σταγονίδια νερού στο καπάκι, ανακινήστε απαλά αυτήν την υγρασία πριν τοποθετήσετε στην καλυμμένη επιφάνεια, αλλά μην αγγίξετε το εσωτερικό του καπακιού.
Επαναλάβετε τα βήματα 19 και 20 για κάθε τρυβλίο Petri, τοποθετώντας τη μία πλευρά του ανεστραμμένου πιάτου στην πλευρά του προηγούμενου πιάτου αντί για το χαρτομάντιλο. Τα πιάτα θα εμφανίζονται ως ένα κλιμακωτό σετ, με κενά στη μία πλευρά έτσι ώστε η υπερβολική υγρασία να εξατμιστεί.
Κοιτάξτε τα ανεστραμμένα τρυβλία Petri για να ελέγξετε εάν εξατμίστηκε η υγρασία στις πλευρές των πλακών. Μόλις καθαριστεί όλη η υγρασία, γυρίστε τις πλάκες προς τα δεξιά και καλύψτε αμέσως με τα καπάκια για χρήση.
Εμβολιάστε το θρεπτικό άγαρ στην πλάκα σκουπίζοντας ένα επίχρισμα που περιέχει την επιθυμητή καλλιέργεια στην επιφάνεια του θρεπτικού άγαρ πριν καλύψετε με το καπάκι. Αναποδογυρίστε το τρυβλίο Petri έτσι ώστε το στερεό να είναι στην κορυφή. Αποθηκεύστε το εμβολιασμένο τρυβλίο Petri με το στερεό στην κορυφή για καλλιέργεια και το καπάκι στο κάτω μέρος για να πιάσετε υγρασία, χαλαρά σωματίδια ή ανάπτυξη.
Πράγματα που θα χρειαστείτε
- Φίλτρα καφέ
- Σουρωτήρι
- 2 μεγάλα, καθαρά μπολ
- 16 ουγκιές ζωμός βοείου κρέατος χωρίς λιπαρά
- 16 ουγκιές απεσταγμένο νερό
- Κατσαρόλα με καπάκι
- Κουζίνα
- 10 γραμμάρια άγαρ αγάρ
- Κουτάλι μέτρησης
- Ανακινητής
- Ρολό χαρτοπετσέτες
- Κάτοχοι δοχείων
- Μεταλλική κουτάλα
- Αποστειρωμένα τρυβλία Petri ή καθαρά φλιτζάνια κρέμας με καπάκια
- Προαιρετικά: χρονοδιακόπτης, trivet, φούρνος, τηγάνι, αλουμινόχαρτο, τηγάνι
Συμβουλές
Εάν εμφανιστεί υπερβολική υγρασία στα καπάκια, στεγνώστε και αποστειρώστε τα καπάκια στο φούρνο στους 375 βαθμούς Φαρενάιτ για τουλάχιστον 1 ώρα (βεβαιωθείτε ότι έχετε τοποθετήσει τα καπάκια σε ένα καθαρό ταψί επενδεδυμένο με αλουμινόχαρτο πριν τα τοποθετήσετε στο φούρνος).
Προειδοποιήσεις
-
Να είστε προσεκτικοί όταν χειρίζεστε το ζεστό δοχείο για να αποφύγετε εγκαύματα. Εάν η πλευρά του δοχείου είναι πολύ ζεστή, το υγρό στο δοχείο είναι πολύ ζεστό. Ο θρεπτικός ζωμός πρέπει να είναι ζεστός για να διανέμεται στα πιάτα, αλλά όχι πολύ ζεστός για να παράγει υπερβολική συμπύκνωση στα τρυβλία Petri κατά την ψύξη και τη ρύθμιση.
Μην αγγίζετε το εσωτερικό του τρυβλίου Petri (δηλαδή, πλάκα ή καπάκι) για να αποφύγετε την εισαγωγή ανεπιθύμητων βακτηρίων στην καλλιέργεια.