Was ist Zählung in der Mikrobiologie?

Mikrobiologie ist die Lehre von Mikroorganismen: mikroskopisch kleine oder kaum sichtbare einzellige Lebensformen wie Bakterien, Archaeen, Protozoen und einige Pilze und sogar einige extrem kleine vielzellige Pflanzen, Tiere und Pilze. Mikrobiologen untersuchen auch lebensechte nicht-organismische Phänomene wie Viren, Prionen, Viroide und Virionen. "Mikrobe" ist ein Sammelbegriff für all diese Entitäten. Zählung in der Mikrobiologie ist die Bestimmung der Anzahl einzelner lebensfähiger Mikroben in einer Probe; vier Grundtechniken sind möglich.

Ein direktes Maß für die Keimzahlbestimmung ist die Standardplattenzählung, auch Viable Count genannt. Für diese Zählung kultivieren Sie eine Probe, indem Sie sie verdünnen, auf Platten mit Kulturmedium legen und für eine bestimmte Zeit inkubieren. Dann zählen Sie die Anzahl der Kolonien und verwenden diese Zahl, um die ursprüngliche Anzahl der Mikroben in der Probe abzuleiten. Technisch gesehen gibt eine Plattenzählung nicht die Anzahl der einzelnen Mikroben an, sondern der "Kolonie-bildenden" Einheiten", weil man nicht sicher wissen kann, ob jede Kolonie tatsächlich von einer einzelnen Mikrobe oder von einer winzigen Gruppe von Mikroben. Diese Zählungen werden jedoch als sehr genau angesehen, um die Anzahl der Mikroben in Originalproben abzuschätzen. Nachteile sind, dass dieser Test zeit- und platzaufwändig ist und eine spezielle Ausrüstung erfordert, die korrekt vorbereitet werden muss.

Direkte mikroskopische Zählungen, auch Gesamtzellzahlen genannt, sind eine weitere Form der direkten Zählung. Zuerst teilen Sie eine Probe in mehrere gleich große Kammern auf. Dann bestimmen Sie die durchschnittliche Anzahl von Mikroben pro Kammer, indem Sie einige oder alle unter einem Mikroskop zählen. Schließlich verwenden Sie diesen Durchschnitt, um die Zahl in der ursprünglichen Einheit zu berechnen. Der Hauptnachteil bei direkten mikroskopischen Zählungen besteht darin, dass es schwierig ist, lebende Mikroben von toten zu unterscheiden, sodass diese Methode möglicherweise keine genaue lebensfähige Zählung liefert.

Trübungstests sind Formen der indirekten Zählung. Trübung ist die Trübung einer Flüssigkeit. Bei der turbidimetrischen Messung geben Sie eine Probe in Lösung, messen die Trübung der neuen Lösung durch Durchstrahlen von Licht mit einem Spektralfotometer, dann schätzen Sie die Anzahl der lebenden Mikroben, die erforderlich wären, um den beobachteten Trübungsgrad zu erzeugen. Der Nachteil hierbei ist, dass jemand bereits zahlreiche Standard-Plattenzählungen der betreffenden Mikrobe durchgeführt haben muss um Probenlösungen unterschiedlicher Trübung herzustellen, damit Sie einen Standard zur Messung Ihrer aktuellen Probe haben gegen. Sie müssen auch darauf achten, dass Sie Ihre Probe nicht zu stark aufkonzentrieren, da eine turbidimetrische Zählung nur dann genau ist, wenn keine Mikroben in der Probe andere blockieren. Bei einem visuellen Trübungsvergleich vergleichen Sie die Trübung Ihrer Probe mit der Trübung einer Einheit gleicher Größe und bekannter Keimzahl und schätzen anhand dieses Vergleichs eine Auszählung.

Zwei weitere Formen der indirekten Zählung sind die Massenbestimmung und die Messung der mikrobiellen Aktivität. Für eine Massenbestimmungs-Auszählung wiegen Sie die Menge an biologischer Substanz in Ihrer Probe, vergleichen Sie dies mit einer Standardkurve für bekannte Keimzahlen gewichten und daraus die ursprüngliche Keimzahl schätzen Vergleich. Bei einer mikrobiellen Aktivitätsmessung messen Sie die Menge eines biologischen Produkts in Ihrer Probe, wie z Stoffwechselabfall, vergleichen Sie dies dann mit einer Standardkurve für bekannte Zahlen und schätzen Sie Ihre Zählung daraus ab Vergleich.