Wissenschaftler und Forscher untersuchen das Bakterienwachstum, indem sie Kulturen in einem Labor herstellen. Petrischalen, die Nähragar enthalten, züchten Bakterienkulturen aus einem einzigen Wisch oder einer Impfung. Die Schüler können zu Hause Nähragar herstellen, indem sie Vorräte aus Lebensmittel- oder Reformhäusern für ein Science Fair-Projekt verwenden. Herkömmliche Küchengeräte und einfaches Küchengeschirr liefern die Werkzeuge, um einen sterilen Nährboden zuzubereiten, der in Petrischalen dosiert werden kann. Das Befolgen steriler Techniken durch Erhitzen der Materialien und Halten der Oberflächen sauber und trocken verbessert die Ergebnisse, da Schimmel und Partikel die Kultur nicht verunreinigen.
Legen Sie einen Kaffeefilter in ein Sieb und hängen Sie das Sieb über die Öffnung der durchsichtigen Schüssel.
Gießen Sie die Brühe langsam in den Filter und achten Sie darauf, dass die Brühe nicht von den Seiten des Filters überläuft. Wenn der Filter mit Partikeln verstopft ist, entfernen Sie den gebrauchten Filter, ersetzen Sie ihn durch einen sauberen Filter und gießen Sie die Brühe weiter.
Entfernen Sie das Sieb und den Filter von der Oberseite der Schüssel und beobachten Sie, ob die Brühe klar erscheint (d. h. keine Schwebstoffe in der Flüssigkeit enthalten sind). Wenn Partikel in der Flüssigkeit schwimmen, wiederholen Sie die Schritte 1 und 2 mit einer zweiten klaren Schüssel und einem frischen Kaffeefilter.
Stellen Sie den Topf auf den Herd und gießen Sie die klare Brühe in den Topf.
Fügen Sie dem Topf mit der Brühe 16 Unzen destilliertes Wasser hinzu.
Schalten Sie den Herd ein und stellen Sie die Hitze auf mittel-niedrig ein. Erhitze die Brühe zum Köcheln (d. h. kleine Bläschen erscheinen am Rand des Topfes).
1 Teelöffel Agar-Agar-Pulver in die siedende Brühe (ca. 2,5 Gramm) geben und die Mischung rühren, bis sich das Pulver aufgelöst hat. Rühre das Pulver unbedingt um, um es aufzulösen und zu verhindern, dass die Gelatine auf den Boden des Topfes sinkt (wo sie anbrennen kann).
Wiederholen Sie Schritt 7, bis sich das gesamte Agar-Agar-Pulver in der Brühe aufgelöst hat.
Rühren Sie die Brühe etwa 1 Minute lang weiter, um sicherzustellen, dass sich das gesamte Pulver vollständig aufgelöst hat.
Den Herd ausschalten, den Deckel auf den Topf legen und die Flüssigkeit mindestens 15 Minuten abkühlen lassen.
Ordnen Sie die sterilen Petrischalen zur einfachen Montage in einer Reihe an, aber entfernen Sie nicht die Deckel. Stellen Sie nach Wunsch einen Untersetzer auf, um den warmen Topf zu halten. Wenn Sie Puddingbecher mit Deckel anstelle von Petrischalen verwenden, sterilisieren Sie die Puddingbecher, indem Sie die Becher und Deckel aufsetzen umgekehrt (auf den Kopf gestellt) auf ein mit Folie bedecktes Backblech legen und im Ofen bei 375 Grad mindestens eine Stunde backen Fahrenheit. Stellen Sie sicher, dass die sterilisierten Becher und Deckel vor der Verwendung vollständig abgekühlt sind.
Berühren Sie vorsichtig die Außenseite des Topfes, um zu überprüfen, ob er sich warm anfühlt, und stellen Sie den Topf auf den Untersetzer. Wenn der Topf zu heiß zum Anfassen ist, warten Sie mindestens 10 Minuten, um den Topf abkühlen zu lassen.
Deckel abnehmen und beiseite stellen. Stellen Sie die Schöpfkelle in den Topf.
Entfernen Sie den Deckel von einer Petrischale und geben Sie Nährbrühe aus, um die Schale zur Hälfte zu füllen. Decken Sie die Schüssel sofort mit dem Deckel ab.
Wiederholen Sie Schritt 14 für jede der Petrischalen.
Lassen Sie die Nährbrühe in den Petrischalen mindestens 1 Stunde ungestört fest werden.
Schütteln Sie die Petrischalen vorsichtig von einer Seite zur anderen, um zu überprüfen, ob die Nährbrühe vollständig verfestigt ist. Wenn die Brühe nicht vollständig geliert ist, warten Sie weitere 20 Minuten, bevor Sie erneut überprüfen.
Decken Sie einen Tisch oder eine ebene Fläche mit einer Rolle Papiertücher ab, um einen sterilen Arbeitsbereich zu schaffen. Reißen Sie ein Blatt Papiertuch ab und falten Sie es viermal zu einem dicken, rechteckigen Bündel. Setzen Sie dieses Wattepad auf ein Ende des Arbeitsbereichs.
Übertragen Sie eine Petrischale in den sterilen Arbeitsbereich und entfernen Sie den Deckel. Drehen Sie die Schüssel vorsichtig um und legen Sie ein Ende auf die Seite des gefalteten Wattestäbchens, sodass es verkehrt herum und leicht angewinkelt liegt (mit einem kleinen Abstand zum Papiertuchklotz).
Drehen Sie den Deckel um und legen Sie ihn über die Petrischale auf die sterile Arbeitsfläche. Wenn Wassertropfen auf dem Deckel erscheinen, schütteln Sie diese Feuchtigkeit vorsichtig ab, bevor Sie ihn auf die abgedeckte Oberfläche legen, aber berühren Sie nicht die Innenseite des Deckels.
Wiederholen Sie die Schritte 19 und 20 für jede Petrischale, indem Sie eine Seite der umgedrehten Schale auf die Seite der vorherigen Schale legen und nicht auf das Papiertuch. Das Geschirr erscheint als versetztes Set, mit Lücken auf einer Seite, damit überschüssige Feuchtigkeit verdunsten kann.
Schauen Sie sich die umgedrehten Petrischalen an, um zu überprüfen, ob die Feuchtigkeit an den Seiten der Teller verdunstet ist. Sobald alle Feuchtigkeit beseitigt ist, drehen Sie die Platten auf die richtige Seite und decken Sie sie sofort mit den Deckeln ab.
Inokulieren Sie den Nähragar auf der Platte, indem Sie einen Tupfer mit der gewünschten Kultur auf der Nähragaroberfläche abwischen, bevor Sie ihn mit dem Deckel abdecken. Drehen Sie die Petrischale um, sodass der Feststoff oben liegt. Bewahren Sie die beimpfte Petrischale mit dem Feststoff oben für die Kultivierung und dem Deckel unten auf, um Feuchtigkeit, lose Partikel oder Wachstum aufzufangen.
Dinge, die du brauchen wirst
- Kaffeefilter
- Sieb
- 2 große, klare Schalen
- 16 Unzen. fettfreie Rinderbrühe
- 16 Unzen. destilliertes Wasser
- Kochtopf mit Deckel
- Herd
- 10 Gramm Agar-Agar
- Messlöffel
- Rührer
- Rolle Papierhandtücher
- Topflappen
- Metallkelle
- Sterile Petrischalen oder klare Puddingbecher mit Deckel
- Optional: Timer, Untersetzer, Backofen, Pfanne, Alufolie, Pfanne
Tipps
Wenn übermäßige Feuchtigkeit auf den Deckeln auftritt, trocknen und sterilisieren Sie die Deckel im Ofen bei 375 Grad Fahrenheit für mindestens 1 Stunde (achten Sie darauf, die Deckel in eine saubere, mit Alufolie ausgelegte Pfanne zu legen, bevor Ofen).
Warnungen
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Seien Sie beim Umgang mit dem heißen Topf vorsichtig, um Verbrennungen zu vermeiden. Wenn der Topfrand zu heiß ist, ist die Flüssigkeit im Topf sehr heiß. Die Nährbrühe sollte warm zum Ausgeben in die Schalen sein, aber nicht zu heiß, um beim Abkühlen und Abbinden zu viel Kondenswasser in den Petrischalen zu bilden.
Berühren Sie nicht das Innere der Petrischale (d. h. Platte oder Deckel), um zu vermeiden, dass unerwünschte Bakterien in die Kultur gelangen.