Wenn Sie die Wirkung des pH-Werts auf die Enzymaktivität testen, sollten Sie den pH-Wert variieren. Sie können dies jedoch auf gute oder schlechte Weise tun. Denken Sie daran, welche zusätzlichen Faktoren die Auswirkungen unterschiedlicher pH-Werte beeinträchtigen können. Andernfalls sind die erhaltenen Ergebnisse möglicherweise nicht auf die pH-Änderung zurückzuführen, sondern auf einen anderen Faktor. Wenn Sie wissen, wie Sie den pH-Wert richtig variieren und welche Faktoren den pH-Wert eines Experiments beeinflussen, können Sie gute Ergebnisse erzielen und verstehen, warum Ihre Ergebnisse möglicherweise nicht genau Ihren Erwartungen entsprechen.
Nur eine Sache ändern
Wenn Sie die Wirkung des pH-Werts auf die Enzymaktivität testen, variieren Sie nur den pH-Wert, während Sie andere Faktoren konstant halten. Diese anderen Faktoren umfassen Enzymkonzentration, Substratkonzentration und Temperatur. Die konstant bleibenden Faktoren werden als Kontrollvariablen bezeichnet. Kontrollvariablen lassen den Schluss zu, dass die in Ihrem Experiment erhaltenen Ergebnisse zur Enzymaktivität auf die Variation des pH-Werts, der unabhängigen Variablen, zurückzuführen sind. Zu wissen, welche Faktoren in einem Experiment nicht geändert werden sollten, ist genauso wichtig wie zu wissen, welcher Faktor zu variieren ist. sonst wird es schwer zu sagen, ob die Ergebnisse tatsächlich auf das eine zurückzuführen sind, das war geprüft.
Wählen Sie eine Säure oder eine Base
Der pH-Wert einer Lösung kann durch Auflösen unterschiedlicher Mengen einer Säure oder einer Base in Wasser verändert werden. Eine Möglichkeit, den Einfluss des pH-Werts auf die Enzymaktivität zu testen, besteht darin, nach und nach Tropfen einer starken Säure oder einer starken Base zuzugeben in die Lösung, die das Enzym enthält, und beobachten Sie dann den Punkt, an dem sich die Enzymaktivität verlangsamt oder stoppt. Eine Säure ist definiert als eine Verbindung, die ein Wasserstoffion, ein sogenanntes Proton (H+), spendet, und eine Base ist definiert als eine Verbindung, die ein Hydroxidion (-OH) spendet. Verschiedene Säuren und Basen haben eine unterschiedliche Anzahl von Protonen oder Hydroxidionen zu verschenken. Nicht alle Protonen oder Hydroxidionen werden sofort abgegeben, wenn einer Lösung eine Säure oder Base zugesetzt wird, aber die Anzahl der abgegebenen Protonen oder Hydroxidionen ändert den pH mit unterschiedlichen Geschwindigkeiten. Daher ist es eine gute Idee, den pH-Wert in einem Enzymexperiment mit nur einer Säure- oder Basenart zu variieren. Andernfalls werden unbeabsichtigt andere Variablen hinzugefügt.
Gewebe ändern auch den pH-Wert
Bei einigen Laborexperimenten, die die Enzymaktivität untersuchen, wird frisches Gewebe zerkleinert, um die Enzyme aus den Zellen freizusetzen, und dann Substrat hinzugefügt, um die Enzymaktivität zu messen. Frisches Gewebe enthält Blut. Aufgrund des Vorhandenseins von Enzymen im Blut, die das im Blut gelöste Kohlendioxidgas in Kohlensäure umwandeln, kann das Gewebe selbst den pH-Wert beeinflussen. Daher ist es bei Experimenten mit Enzymaktivität in frischem Gewebe hilfreich, das Blut in einem Becher mit kaltem Wasser abzuwaschen, bevor das Gewebe zermahlen wird. Dadurch wird die unbeabsichtigte pH-Änderung durch das Gewebe minimiert, so dass die gezielte pH-Änderung untersucht werden kann.
Halten Sie die Größen gleich
Wie oben diskutiert, ist die Enzymkonzentration ein Kontrollfaktor, der beim Testen der Wirkung des pH-Werts auf die Enzymaktivität nicht variiert werden sollte. Experimentelle Verfahren variieren jedoch immer noch von Natur aus die Enzymkonzentration auf subtile Weise. Wenn man eine reine Enzymlösung verwendet, dann hält man die Enzymkonzentration konstant. In Experimenten, in denen das Enzym jedoch aus frischem Gewebe stammt, wie Kartoffelstücken, Pflanzenstücken oder Leberstücken, ändert die Größe der Stücke die Enzymmenge in jedem Reagenzglas. Daher ist es hilfreich, die Gewebestücke so gleichmäßig wie möglich zu schneiden. Dies ist ein weiteres Beispiel dafür, wie das Wissen, was nicht zu ändern ist und warum es schwierig ist, Änderungen nicht vollständig zu vermeiden, bei der Interpretation der Ergebnisse einer Variation eines Faktors wie des pH-Werts hilft.