HPLC (Hochleistungsflüssigkeitschromatographie) und GC (Gaschromatographie) sind beide Methoden Wissenschaftler verwenden, um Proben zu analysieren, um zu bestimmen, was die Probe enthält oder die Konzentration von Molekülen in der Stichprobe. Beide verwenden das gleiche Prinzip, dass schwerere Moleküle langsamer eluieren oder fließen als leichtere (die Polarität spielt auch eine Rolle bei der Elutionszeit). Obwohl die Idee dieselbe ist, unterscheiden sich GC und HPLC in einigen Punkten.
Die mobile Phase
Die mobile Phase von Chromatographiegeräten ist die Substanz, die die Probe durch die Maschine bewegt. Bei der HPLC ist die mobile Phase eine Flüssigkeit, die aus einem organischen Lösungsmittel, Reinstwasser und anderen Inhaltsstoffen besteht, um die Kompatibilität mit der Probe zu gewährleisten. GC verwendet Gas als mobile Phase. Als Gase werden Helium, Stickstoff, Argon oder Wasserstoff verwendet, je nachdem, was analysiert wird.
Die Säulen
Wenn die Proben über Chromatographiesäulen wandern, interagieren die Probe und die mobile Phase mit dem Säuleninhalt, wodurch die Komponenten der Probe zu unterschiedlichen Zeiten eluiert werden. HPLC-Säulen sind typischerweise 4 bis 6 Zoll lange Metall- oder Glasröhrchen, die dicht mit Kieselsäure oder unterschiedlichen Kohlenstoffkettenlängen gepackt sind. GC-Systeme haben gewendelte Kapillarsäulen mit Innenwänden, die je nach Laborbedarf mit verschiedenen Materialien beschichtet sind. Ausgedehnt können GC-Säulen Längen von 100 Fuß erreichen.
Die Beispiele
GC wird für flüchtige Verbindungen (solche, die sich schnell zersetzen) verwendet, während HPLC für weniger flüchtige Proben besser geeignet ist. Wenn eine Probe Salze enthält oder eine Ladung trägt, muss sie mit HPLC und nicht mit GC analysiert werden.
Temperaturkontrolle
GC-Säulen sind in einem Ofen innerhalb der Maschine untergebracht. Ein Computer ändert die Temperatur, während Proben analysiert werden. Je höher die Temperatur, desto schneller eluiert die Probe, aber zu hohe Temperaturen führen zu schlechten Ergebnissen. HPLC-Säulen werden jederzeit auf einer stabilen Temperatur (meistens Raumtemperatur) gehalten.