Ob Sie entgasen oder entlüften müssen, Ihre Pufferlösung hängt von ihrer Anwendung ab. Wenn überschüssiger Sauerstoff im Puffer die gesuchte chemische Reaktion beeinflusst oder wenn affect die Bildung von Luftblasen in der Lösung beeinträchtigt die Messwerte oder den Durchfluss, Sie müssen Ihren Puffer. In diesem Artikel wird davon ausgegangen, dass Sie Ihren Puffer bereits vorbereitet und ggf. gefiltert haben.
Die Entgasung durch Vakuum ist die gebräuchlichste Methode, um Luft aus einer Pufferlösung zu entfernen. Geben Sie Ihre Lösung in einen Seitenarmkolben mit Rührstäbchen und verwenden Sie ein Gummistopfen oben abzudichten. Stellen Sie den Kolben auf eine Rührplatte und schalten Sie die Platte ein, sodass sich der Rührstab mit mittlerer Geschwindigkeit dreht. Dies hilft, Luft aus der Lösung zu entfernen. Schließen Sie den Schlauch für das Vakuumsystem am Seitenarm der Flasche an und schalten Sie das Vakuum mit geringer Geschwindigkeit ein. Lassen Sie die Lösung mindestens eine Stunde lang entgasen.
Bei Verwendung des gleichen Setups mit der Seitenarmflasche und dem Vakuum können Sie die Rührplatte und den Rührstab weglassen und die Flasche in einen Beschaller stellen. Der Beschaller verwendet Schallwellen, die mehr Luft aus Ihrer Lösung freisetzen als der Rührstab.
Helium-Spülung – auch Helium-Bubbling oder Inertgas-Spülung genannt – ist eine der effektivsten Möglichkeiten, Ihren Puffer zu entgasen, wenn Sie in Ihrem Labor eine Heliumleitung haben. Platzieren Sie eine Sprudelfritte – ein Anschlussstück mit einem steinartigen Filter am Ende – am Ende Ihrer Heliumleitung und legen Sie die Leitung und die Fritte in Ihre Lösung. Schalten Sie das Helium etwa fünf Minuten lang bei sehr niedrigem Druck ein, damit das Helium den Sauerstoff entfernen kann. Dies muss möglicherweise täglich wiederholt werden.
Einige Chromatographiesysteme verfügen über einen Inline-Lösungsentgaser. Das System entfernt das Gas aus Ihrem Puffer, bevor es durch die Chromatographiesäule geleitet wird. Sie müssen Ihre Lösung nicht vorher entgasen. Wenn Sie jedoch ein Grundlinienrauschen in Ihrem Chromatogramm feststellen, sollten Sie zusätzlich zum Inline-Entgaser eine der oben genannten Methoden zum Entgasen in Betracht ziehen.