Selvom de ikke kan ses med det blotte øje, er bakterier overalt. De findes i mad, jord, vand, overflader i vores hjem og i og på vores kroppe. Bakterier findes generelt i blandede populationer. Isolering af en bestemt bakterie fra andre bakteriearter i en given prøve tillader mikrobiologer at undersøge dens struktur og funktion, karakteristika anvendt i dens identifikation. Mikrobiologer isolerer ofte bakterier ved hjælp af en af flere stribepladeteknikker.
Værktøjer
En inokulerende sløjfe bruges til at overføre mikroorganismer. Den består af en nichrom- eller platinatråd med en lille, cirkulær sløjfe i den ene ende. Den anden ende er lige og glider ind i et håndtag. Plastik-engangs-inokuleringssløjfer er også tilgængelige. Bakterier kan kun isoleres, hvis de vokser. Mikrobiologer dyrker bakterier til stribe pladeisolering i lavvandede, runde petriskåle fyldt med et fast medium, kaldet agar. Agar efterligner det miljø, hvor bakterierne naturligt vokser. De mediefyldte skåle er sterile og med låg for at forhindre vækst af uønskede organismer. Under isolering af stregplader steriliseres inokuleringssløjfen gentagne gange i flammen på en Bunsen-brænder.
Princip
Streak plate-teknikken er den mest populære metode til isolering af specifikke bakterier fra en prøve, der indeholder en blanding af mikroorganismer. Teknikken fortynder i det væsentlige antallet af organismer og reducerer deres tæthed. Det giver mikrobiologer mulighed for at skelne og isolere individuelle bakteriekolonier. En koloni er en synlig klynge af bakterier. Alle bakterier i en enkelt koloni stammer fra den samme bakteriecelle. Derfor er individuelle kolonier “rene” kolonier. Den rene koloni overføres til en anden plade for at producere en ren kultur bestående af en type bakterier.
Procedure
Når det er gjort ordentligt, tynder stregpladeisolering en prøve ud og gør det muligt for individuelle bakterieceller at udvikle sig til isolerede kolonier. En mikrobiolog begynder med at sterilisere inokuleringssløjfen i en flamme. Hun afkøler sløjfen ved at røre den til agaren og dypper derefter sløjfen ned i prøven og spreder den frem og tilbage for at dække et stykke af pladen. Hun steriliserer løkken, afkøler den og inokulerer en anden tilstødende del af pladen ved at trække løkken gennem det første afsnit flere gange og dækker det andet afsnit ved hjælp af en zigzag bevægelse. Dette opfanger et lille antal bakterier fra den første sektion og overfører dem til den anden sektion. Antallet af gange, denne grundlæggende procedure gentages, afhænger af den anvendte stribeplademetode. På trods af metoden bruges den originale prøve til kun at inokulere den første sektion af pladen.
Streak Plate Method
Stribeplademetoder varierer efter antallet af stribede agarsektioner. T-streak-metoden bruger tre sektioner: den øverste halvdel og to lige store bundsektioner. Den indledende podning placeres i den øverste halvdel af pladen. Bakterier trækkes fra den øverste sektion til en af de nederste sektioner, derefter fra den nederste sektion til den anden. I kvadrantmetoden er fire lige store sektioner stribet. Den kontinuerlige stribemetode involverer typisk inokulering af den øverste halvdel af pladen, drejning 180 grader, og inokulering af den anden halvdel af pladen uden at sterilisere sløjfen eller trække bakterier fra den foregående afsnit.