Sådan identificeres Enterobacter Aerogenes API 20E

Enterobacter aerogenes og andre arter af Enterobacteriaceae er lette at identificere ved hjælp af API-20E testkittet. Dette kit, fremstillet af bioMeriuex Inc., indeholder 20 minirør eller brønde til testen. Testen består i podning af en ren bakteriesuspension i testbrøndene og aflæsning af de farvereaktioner, der opstår. Identifikation er afhængig af at konvertere resultaterne af disse farvereaktioner til en syvcifret kode kendt som Analytical Profile Index. At matche denne kode med producentens database giver en identifikation af organismen.

Åbn en ampul indeholdende 5 ml natriumchlorid 0,85 procent medium. Fjern en enkelt koloni fra en 18 til 24 timer gammel isolationsplade med en pipette, og tilføj den i ampullen. Bland for at opnå en homogen suspension. Brug denne suspension, så snart du er færdig med at forberede den.

Opret en inkubationsboks, der består af bikagede brønde i en bakke udstyret med et låg. Åbn kassen, og tilsæt 5 ml demineraliseret eller destilleret vand i bakkebrøndene. Pak striben, der følger med i API 20E-testkittet, og læg den i inkubationsboksen.

instagram story viewer

Fyld røret og kappen af ​​brøndene mærket "GEL", "VP" og "CIT" med den suspension, du har forberedt. I de resterende brønde skal du fylde bakteriesuspensionen i røret, men ikke kappen. Tilsæt mineralolie i brøndene mærket "ADH", "ODC", "LDC", "URE" og "H2S" for at skabe et anaerobt miljø.

Dæk inkubationsboksen med låget, og inkuber ved en temperatur mellem 34 og 38 grader Celsius i 18 til 24 timer.

Overhold brøndene, og bemærk reaktionerne på resultatarket. Forudsat at mindst tre tests er positive, skal du gå videre til farvereaktionerne ved hjælp af de kemiske testopløsninger eller reagenser, der fulgte med sættet. Tilsæt en dråbe TDA-reagens i den godt markerede "TDA" og en dråbe hver af VP1- og VP2-reagenser i godt markeret "VP." Hvis færre end tre tests blev positive, inkuberes strimlerne i yderligere 24 timer, før du tilføjer disse reagenser.

Overhold de farveændringer, der produceres i brøndene. En rødbrun farve i TDA indikerer en positiv reaktion. Vent i 10 minutter efter tilsætning af reagenser fra sættet i VP1 og VP2. Overvej en rød eller lyserød farve som positiv, og en lyserød farve fremstår som negativ efter 10 minutter.

Udfør oxidasetesten som specificeret af producenten af ​​sættet, og registrer dens resultater sammen med resultaterne af de foregående 20 tests.

Indfør dette syvcifrede profilnummer i kitproducentens database via en berøringsfarvet telefon. Vent med at modtage identifikationen fra databasen. Hvis profilnummeret ikke giver specifikke resultater, skal du udføre de supplerende tests, der er specificeret af producenten af ​​sættet.

Teachs.ru
  • Del
instagram viewer