HPLC tilbyder en hurtig, automatiseret og meget nøjagtig metode til at identificere bestemte kemiske komponenter i en prøve, men det kan være dyrt, komplekst og fungerer ikke for alle prøver. Medicinske, retsmedicinske, miljømæssige og fremstillingslaboratorier bruger teknikken til at kvantificere og adskille kemikalierne i en prøve. HPLC har både fordele og ulemper sammenlignet med andre teknikker.
HPLC og lignende teknikker
Ligesom andre former for kromatografi tillader HPLC adskillelse af kemiske bestanddele ved anvendelse af en mobil fase og en stationær fase. Den mobile fase er flydende, og den stationære fase er fast. Fordi de forskellige komponenter bevæger sig med forskellige hastigheder, adskiller de sig fra hinanden. Alternative teknikker inkluderer kapillærelektroforese, hvor stoffer vandrer gennem opløsninger i en elektrisk felt og andre kromatografiske fremgangsmåder, såsom ekstraktion af fast fase, gaskromatografi og tyndt lag kromatografi.
Hastighed, effektivitet og nøjagtighed
Sammenlignet med andre kromatografiske teknikker, såsom TLC, er HPLC ekstremt hurtig og effektiv. Det bruger en pumpe i stedet for tyngdekraften til at tvinge et flydende opløsningsmiddel gennem et fast adsorberende materiale, hvor forskellige kemiske komponenter adskiller sig, når de bevæger sig ved forskellige hastigheder. Processen kan afsluttes på cirka 10 til 30 minutter, og den leverer høj opløsning. Det er nøjagtigt og meget reproducerbart. Fordi det stort set er automatiseret, kan basale HPLC-kørsler udføres med minimal træning.
Omkostninger og kompleksitet
På trods af dets fordele kan HPLC være dyrt, hvilket kræver store mængder dyre organiske stoffer. Teknikker såsom fast faseekstraktion og kapillær elektroforese kan være billigere og endnu hurtigere, især til analyse under god fremstillingspraksis. Selvom det er relativt let at bruge eksisterende HPLC-metoder, kan det være komplekst at foretage fejlfinding af problemer eller at udvikle nye metoder. Dette skyldes i vid udstrækning en række forskellige moduler, kolonner og mobilfaser.
Følsomhed og opløsning
Generelt er HPLC alsidig og ekstremt præcis, når det kommer til at identificere og kvantificere kemiske komponenter. Med mange involverede trin afhænger HPLC's præcision stort set af, at processen er automatiseret og derfor meget reproducerbar. HPLC har lav følsomhed for visse forbindelser, og nogle kan ikke detekteres, da de er irreversibelt adsorberet. Flygtige stoffer adskilles bedre ved gaskromatografi.