Jak je připraven vzorek pro prohlížení pod mikroskopem?

Dříve neviditelná oblast byla odhalena počátkem 16. století, kdy konstrukce prvních složených mikroskopů vedla k zásadním revizím vědeckého porozumění. Základní složené mikroskopy jsou nyní standardním vybavením v lékařství a přírodních vědách. Procházející viditelné světlo svítí tenkými přípravky pro zvětšení. Od roku 1931 byly vyvinuty transmisní a skenovací elektronové mikroskopy. K prohlížení vzorků nepoužívají optické světlo, ale paprsky elektronů a magnetické pole. Příprava vzorků vyžaduje zejména pro institucionální výzkum složité a drahé vybavení.

Porozumění složeným mikroskopům

Existuje několik specializovaných typů složených mikroskopů, ale nejběžnější jsou mikroskopy světlého pole. Vzorky pro ně by měly být jen několik mikronů, což je miliontina metru, tlusté. Silnější vzorky nepropouštějí dostatek světla a neumožňují přesné zaostření. Mikroskopy jasného pole mají tubu s objektivy ve spodní části, nejblíže ke vzorku, a oční čočku nebo okulár nahoře. Několik objektivů s různým zvětšením se točí na revolverové hlavě nebo věži. Jeviště těsně pod hlavicí objektivu drží podložní sklíčko a pod ním svítí zdroj světla kondenzátorem. Moderní složené mikroskopy mohou zvětšit objekt od 1 000 do 2 000násobku jeho původních rozměrů.

Celé držáky

U drobných předmětů, jako jsou vlasy, malý hmyz, části hmyzu nebo pylová zrna, se vzorek umístí přímo na střední část sklíčko ze skleněného nebo plastového mikroskopu s malým množstvím montážního média, obvykle permanentní produkt ze syntetické nebo přírodní pryskyřice diapozitivy. U dočasných skluzů, jako je kapka vody v jezírku obsahující mikroorganismy, je voda upevňovacím médiem. Chraňte vzorky krycím sklíčkem, kulatým nebo hranatým velmi tenkým kouskem skla nebo plastu. Některé vzorky potřebují dobře vidět barvení přírodními nebo syntetickými barvivy určenými pro mikroskopii.

Tykve a šmouhy

Jednoduchým způsobem, jak připravit tenký vzorek, je zmáčknout nebo zploštit malý kousek tkáně pod krycím sklíčkem. Často se používá ve vzorcích rostlin k vidění chromozomů, rychle rostoucích tkání, jako jsou kořenové špičky nebo prašníky procházející buněčné dělení jsou konzervovány fixačním činidlem, poté změkčeny a obarveny, aby odhalily chromozomy. Jemný tlak z konce gumy tužky se středem nad krycím sklouznutým vzorkem tlačí buňky od sebe do jedné vrstvy. V nátěrech se vzorek roztírá tence po jednom sklíčku pomocí jiného sklíčka jako rozmetadla a výsledný nátěr se vysuší a obarví. V medicíně jsou vzorky tělesných tekutin, jako je krev, mozkomíšní tekutina nebo sperma, rozmazané.

Sekce obarvených tkání

Složitější postup řezání nastává, když je třeba studovat strukturu a organizaci celého malého organismu nebo tkáňového kusu. U většiny vzorků je nejprve tkáň konzervována a vytvrzena a voda je odstraněna. Poté je vzorek uložen do tuhého média, jako je vosk nebo plast, a pomocí přesného stroje zvaného mikrotom je nakrájen na velmi tenké úseky o tloušťce jen několik mikronů. Vzorek je orientován tak, aby při řezu poskytoval průřezy nebo podélné řezy. Řezy se přilepí na podložní sklíčka mikroskopu, zalévací médium se odstraní a tkáně se obarví, aby se odlišily struktury a buňky. Tam, kde je nezbytná rychlost, například při chirurgických biopsiích na rakovinu, se vzorky zmrazí, nakrájejí na zmrazovací mikrotom, obarví a vyšetří.

  • Podíl
instagram viewer