Agar je rosolovitá látka pocházející z vyčištěných buněčných stěn červených řas. Přidává se do mikrobiologických médií, což jsou materiály, na nichž se v laboratořích pěstují mikroorganismy, aby látka měla pevnější strukturu. Agar nemá žádnou nutriční hodnotu, takže když jej vědci používají ke kultivaci mikroorganismů, přidávají různé živiny ke zvýšení růstu bakterií v Petriho miskách nebo ve zkumavkách. Když vědci skladují bakterie ve zkumavce, označuje se to jako sklon agaru, protože kapalné růstové médium tuhne, když je zkumavka v nakloněné poloze. Vrchní část šroubovacího uzávěru na šikmém povrchu zabraňuje vysychání agaru.
Médium je pro šikmé připraveno jinak než Petriho misky. Sterilizace se provádí agarem ve zkumavkách; Petriho misky jsou předem sterilizovány a poté do nich nalit sterilizovaný agar. Změřte potřebné množství vody a vložte ji do Erlenmeyerovy baňky. Zahřívejte ho na sporáku, dokud téměř nevře. V případě potřeby přidejte další přísady a směs pomalu a neustále míchejte, dokud se nerozpustí. Tyto přísady mohou zahrnovat hovězí extrakt, pepton a pufry pH, v závislosti na typu kultivovaného mikroorganismu.
Před přidáním dehydratovaného agarového prášku jej smíchejte s malým množstvím studené destilované vody, abyste zabránili hrudkování. Při přidávání agaru do horké kapaliny buďte opatrní, protože může pěnit a přetékat z hrnce. Přidejte po malém množství agaru a míchejte, aby se agar rovnoměrně rozložil. Když se směs začne vařit, vypněte oheň, než začne vřít.
Nezakryté zkumavky vložte na stojan na zkumavky. Naplňte zkumavky přenesením asi 5 mililitrů - asi 0,17 unce nebo 1 čajové lžičky - roztaveného agaru z hrnce pomocí sterilní pipety. Volně uzavřete každou zkumavku, protože agar nebude sterilizován, pokud bude těsně uzavřen. Sterilizujte všechny zkumavky v autoklávu po dobu asi 25 minut při teplotě 121 stupňů Celsia nebo 250 stupňů Fahrenheita.
Když je agar ještě horký, opatrně nakloňte stojan, který drží zkumavky na pevném povrchu nebo silná kniha, ujistěte se, že médium uvnitř zkumavek je ve srovnání se zkouškou v šikmé poloze trubky. Nechejte médium vychladnout a ztuhnout v tomto úhlu, což zvětšuje povrch agaru. Po ochlazení agaru pevně utáhněte víčka zkumavek. Jakmile agar ztuhne, jsou sklony připraveny k použití. Mohou být skladovány při pokojové teplotě nebo v chladničce pro budoucí použití.
Naočkujte šikmo přenosem buněk očkovací smyčkou z mikroorganismu s jednou kolonií na destičce na šikmý povrch. Posuňte smyčku po povrchu šikmého povrchu a zkuste znovu zkumavky. Inkubujte šikmou plochu, dokud není patrný růst, a poté zkumavku vložte do chladničky.