Western blot test, také nazývaný imunoblot, je testem na specifický protein ve směsi proteinů. Western blot test se provádí po gelové elektroforéze nebo testu pomocí enzymového imunosorbentního testu (ELISA) a používá protilátky k identifikaci specifických proteinů.
Elektroforéza na polyakrylamidovém gelu s dodecylsulfátem sodným (SDS-PAGE) je běžný test používaný k oddělení proteinů pro použití při Western blotu. Při pohybu gelovou matricí jsou proteiny odděleny podle hmotnosti a elektrických vlastností.
Test ELISA používá k vytvoření testovacího povrchu enzymy nebo protilátky připojené k pevnému povrchu. Poté se na zkušební povrch přidá vzorek. Protilátky nebo enzymy reagující nebo připojené k proteinům naznačují pozitivní výsledek.
Western blot test se provádí po gelové elektroforéze. Oddělené proteiny jsou přeneseny (nebo blotovány) na nitrocelulózové nebo nylonové membrány a identifikovány specifickými protilátkami, které jsou označeny sekundárním proteinem.
Test Western blot se používá k potvrzení pozitivních výsledků buď gelové elektroforézy, nebo testů ELISA. Test Western blot může identifikovat proteiny konkrétněji a může vyloučit falešné pozitivity.