Mikrobiologka používá barvení chitinem, aby pod mikroskopem jasně viděla houby. Houby používají chitin jako strukturní materiál ve svých buněčných stěnách, takže skvrna dobře ukazuje buněčnou stěnu. Laktofenolová bavlněná modrá skvrna je nejběžnější barvou pro houby. Fenol ničí mikroorganismy a brání houbovým enzymům v rozpadu buňky. Bavlněné modré barvivo změní chitin na modrou. Chitinové barvení je relativně levný postup s levnými materiály. Můžete si buď vyrobit vlastní barvivo, nebo koupit komerčně připravenou skvrnu.
Připravte si roztok laktofenolové bavlněné modři. Pomocí citlivé váhy navažte 0,05 gramu modrozeleného barviva. Smíchejte barvivo s 20 mililitry destilované vody ve zkumavce a nechte přes noc.
Před dokončením přípravy skvrn následující den si nasaďte rukavice. Do kádinky se vloží 20 ml kyseliny mléčné a smíchá se s 20 g krystalů fenolu. Míchejte, dokud se směs nerozpustí. Přidejte 40 ml glycerolu a promíchejte. Poté vatový modrý roztok přeceďte přes kousek filtračního papíru do kádinky a důkladně promíchejte.
Alternativně použijte komerčně připravený zdroj skvrny. Skvrnu skladujte při pokojové teplotě.
Označte mikroskopické sklíčko identifikačním jménem nebo číslem vzorku. Jedním sterilním kapátkem naneste jednu kapku vzorku vody na střed mikroskopického sklíčka. U suchého vzorku naneste na podložní sklíčko jednu kapku 70% alkoholového roztoku a poté pomocí suchého vzorku promíchejte suchý vzorek do alkoholu.
Pomocí čistého kapátka přeneste dvě kapky laktofenolové bavlněné modré skvrny na střed sklíčka. Pokud používáte 70 procent alkoholu na podložní sklíčko, proveďte to dříve, než se alkohol ze podložky odpaří.
Dotkněte se jedné hrany krycího sklíčka mikroskopu jedné hrany přípravy mokrého vzorku. Nechte skluz jemně spadnout na přípravu vzorku a zajistěte, aby pod sklíčkem nezůstaly žádné vzduchové bubliny. Obarvený vzorek je nyní připraven k vyšetření pod mikroskopem.
