Během chromatografie na tenké vrstvě technik umístí skvrny chemické směsi na rovnou desku potaženou vrstvou absorpčního materiálu a poté posadí spodní část destičky do rozpouštědla. Jak se rozpouštědlo pohybuje nahoru po desce, chemikálie ve směsi se pohybují nahoru s různými rychlostmi, takže se oddělují. Tento test určuje, které chemikálie jsou ve směsi, porovnáním rychlosti cestování neznámých se známými standardy. Výsledky však mohou být ovlivněny mnoha faktory.
TL; DR (příliš dlouhý; Nečetl)
Hodnoty retenčních faktorů v chromatografii na tenké vrstvě jsou ovlivněny absorbentem, rozpouštědlem, samotnou chromatografickou deskou, technikou aplikace a teplotou rozpouštědla a desky.
Faktory retence
Retenční faktor pro chemickou látku během chromatografie na tenké vrstvě je měřítkem toho, jak daleko se pohybuje nahoru po desce v reakci na pohyb rozpouštědla. Vzhledem k tomu, že absolutní pohyb chemikálie závisí na tom, jak daleko se rozpouštědlo pohybuje, vypočítáte hodnoty retenčního faktoru vzhledem ke stupni pohybu rozpouštědla. Retenční faktor pro chemickou látku je svislá vzdálenost posunutá chemickou látkou od místa, kde byla původně aplikovaný na desku, dělený vzdáleností ujetou rozpouštědlem - měřeno od stejného začátku směřovat.
Tenkovrstvá chromatografie
Samotná tenkovrstvá chromatografická destička může ovlivnit hodnotu retenčního faktoru získanou pro danou chemickou látku. Tenkovrstvé chromatografické desky mohou být potaženy různými absorpčními tuhými látkami; nejčastěji oxid křemičitý nebo oxid hlinitý. Protože retenční faktor je založen na relativní afinitě chemické látky k absorpčnímu prostředku ve srovnání s rozpouštědlem, může změna absorpčního činidla výrazně změnit retenční faktor. Tloušťka a rovnoměrnost vrstvy absorbentu se také může u jednotlivých desek lišit, zejména jsou-li vyráběny ručně. Tyto faktory mohou také změnit hodnotu retenčního faktoru pro chemikálie.
Faktory retence dopadů na rozpouštědla
Protože rozpouštědlo nese chemikálii na desku, bude mít konkrétní použité rozpouštědlo také podstatný dopad na hodnotu retenčního faktoru pro chemikálii. Rozpouštědlo, které má silnější interakci pro určitou chemickou látku, snáze překoná jakékoli afinitu chemikálie k absorpční vrstvě a posunout tuto chemikálii dále v daném období čas. Směsi rozpouštědel mohou mít také různé účinky v závislosti na podílu každého rozpouštědla.
Další faktory
Existuje několik dalších faktorů, které mohou v některých případech ovlivnit retenční faktor. Teplota rozpouštědla a destičky se může mírně měnit, protože například rozpouštědlo může často lépe rozpouštět chemikálie, které transportuje, při vyšších teplotách. Technika technika při aplikaci vzorku na destičku může také změnit retenční faktor. Nanesení příliš velkého množství vzorku může mít za následek, že se velké difuzní pruhy chemikálií pohybují nahoru po desce, což ztěžuje přesné měření vzdálenosti, po které byla chemikálie přepravována.