HPLC nabízí rychlou, automatizovanou a vysoce přesnou metodu k identifikaci určitých chemických složek ve vzorku, ale může být nákladná, složitá a nefunguje u všech vzorků. Lékařské, forenzní, environmentální a výrobní laboratoře používají tuto techniku k kvantifikaci a oddělení chemikálií ve vzorku. HPLC má ve srovnání s jinými technikami výhody i nevýhody.
HPLC a podobné techniky
Stejně jako jiné formy chromatografie umožňuje HPLC separaci chemických složek pomocí mobilní fáze a stacionární fáze. Mobilní fáze je kapalná a stacionární fáze pevná. Protože se různé komponenty pohybují různými rychlostmi, oddělují se od sebe navzájem. Alternativní techniky zahrnují kapilární elektroforézu, při níž látky migrují elektricky přes roztoky pole a další chromatografické metody, jako je extrakce na pevné fázi, plynová chromatografie a tenká vrstva chromatografie.
Rychlost, účinnost a přesnost
Ve srovnání s jinými chromatografickými technikami, jako je TLC, je HPLC extrémně rychlá a efektivní. Využívá čerpadlo, nikoli gravitaci, k protlačení kapalného rozpouštědla pevným adsorpčním materiálem, přičemž se při jeho pohybu různými rychlostmi odlučují různé chemické složky. Proces lze dokončit zhruba za 10 až 30 minut a poskytuje vysoké rozlišení. Je přesný a vysoce reprodukovatelný. Protože je do značné míry automatizovaný, lze základní běhy HPLC provádět s minimálním zaškolením.
Náklady a složitost
Přes své výhody může být HPLC nákladná a vyžaduje velké množství drahých organických látek. Techniky, jako je extrakce na pevné fázi a kapilární elektroforéza, mohou být levnější a ještě rychlejší, zejména pro analýzu při správné výrobní praxi. Ačkoli je relativně snadné použít existující metody HPLC, může být složité řešit problémy nebo vyvíjet nové metody. To je do značné míry způsobeno řadou různých modulů, sloupců a mobilních fází.
Citlivost a rozlišení
Obecně je HPLC univerzální a extrémně přesná, pokud jde o identifikaci a kvantifikaci chemických složek. S mnoha zapojenými kroky je přesnost HPLC do značné míry na automatizovaném procesu, a proto je vysoce reprodukovatelná. HPLC má pro určité sloučeniny nízkou citlivost a některé nelze detekovat, protože jsou nevratně adsorbovány. Těkavé látky se lépe oddělují plynovou chromatografií.