Enterobacter aerogenes и други видове Enterobacteriaceae са лесни за идентифициране с помощта на тестовия комплект API-20E. Този комплект, произведен от bioMeriuex Inc., включва 20 мини туби или кладенци за теста. Тестът се състои от инокулиране на чиста бактериална суспензия в тестовите ямки и отчитане на възникналите цветни реакции. Идентификацията разчита на преобразуването на резултатите от тези цветни реакции в седемцифрен код, известен като индекс на аналитичния профил. Съчетаването на този код с базата данни на производителя осигурява идентификация на организма.
Отворете ампула, съдържаща 5 ml натриев хлорид 0,85% среда. Отстранете единична колония от изолационна плоча на 18 до 24 часа с пипета и я добавете в ампулата. Смесете до получаване на хомогенна суспензия. Използвайте това окачване веднага щом приключите с приготвянето му.
Поставете кутия за инкубация, състояща се от пчелни кладенци в тава, снабдена с капак. Отворете кутията и добавете 5 ml деминерализирана или дестилирана вода в кладенчетата на тавата. Разопаковайте лентата, предоставена в тестовия комплект API 20E, и я поставете в кутията за инкубация.
Напълнете епруветката и купулата на ямките с надпис "GEL", "VP" и "CIT" с суспензията, която сте приготвили. В останалите ямки напълнете бактериалната суспензия в епруветката, но не и в купулата. Добавете минерално масло в кладенците с маркировка "ADH," ODC, "LDC," URE "и" H2S ", за да създадете анаеробна среда.
Покрийте кутията за инкубация с капака и инкубирайте при температура между 34 и 38 градуса по Целзий в продължение на 18 до 24 часа.
Наблюдавайте ямките и отбелязвайте реакциите на листа с резултати. При условие, че поне три теста са положителни, преминете към цветните реакции, като използвате химическите разтвори за тестване или реагентите, приложени към комплекта. Добавете една капка реагент TDA в добре маркирания "TDA" и капнете всеки от реагентите VP1 и VP2 в добре маркирани „VP“. Ако по-малко от три теста се окажат положителни, инкубирайте лентите за още 24 часа, преди да ги добавите реагенти.
Наблюдавайте промените в цвета, получени в кладенците. Червеникавокафяв цвят в TDA показва положителна реакция. Изчакайте 10 минути след добавяне на реагенти от комплекта във VP1 и VP2. Считайте червения или розов цвят за положителен, а бледорозовият цвят, който се появява след 10 минути като отрицателен.
Извършете теста за оксидаза, както е посочено от производителя на комплекта, и запишете резултатите му заедно с резултатите от предишните 20 теста.
Вкарайте този седемцифрен номер на профила в базата данни на производителя на комплекта чрез телефон с тъч-тон. Изчакайте да получите идентификацията, предоставена от базата данни. Ако номерът на профила не дава конкретни резултати, извършете допълнителните тестове, посочени от производителя на комплекта.