يعد حساب عيار الفيروس طريقة معقدة للقول إن أحد العلماء يحسب عدد الفيروسات في عينة معينة. لحساب التتر الفيروسي ، يصيب العلماء ألواح البكتيريا النامية بمحاليل فيروسية بتركيزات مختلفة و اكتشف عدد الفيروسات في المحلول الأصلي بإحصاء البكتيريا التي ماتت بسبب الفيروس عدوى.
ارتدِ القفازات واملأ 10 أنابيب استزراع بـ 9 مل من المرق وقم بتسميتها "10 ^ -1" و "10 ^ -2" و "10 ^ -3" و وهكذا حتى "10 ^ -10." سيتم استخدام هذه الأنابيب للتخفيفات التسلسلية الفيروسية المستخدمة لحساب الملتهمة عيار. نظرًا لأن الفيروسات يمكن أن تنمو لتصل إلى تركيزات عالية بشكل لا يصدق ، فأنت بحاجة إلى تخفيفها من أجل حسابها بشكل فعال. يمثل كل أنبوب تخفيفًا للفيروس بمقدار عشرة أضعاف.
خذ 1 مل من المزرعة المختلطة من الأنبوب المسمى "10 ^ -1" وانقلها باستخدام ماصة جديدة إلى الأنبوب التالي ، المسمى "10 ^ -2". امزج هذا الأنبوب أيضًا.
استمر في هذا النمط لإنشاء سلسلة تخفيف متسلسلة. سوف ينتهي بك الأمر مع 9 أنابيب من 9 مل وأنبوب واحد من 10 مل. سيتم تخفيف الأحمال الفيروسية في الأنابيب الخاصة بك في أي مكان من 10 مرات (الأنبوب الأول) أو 100 مرة (الأنبوب الثاني) إلى عشرة مليارات مرة (الأنبوب الأخير).
أضف قطرتين من الثقافة البكتيرية إلى أجار الخاص بك واخلطه برفق. هذه هي البكتيريا التي سيتم قتلها ، مما يسمح لك بحساب عدد جزيئات الفيروس في محلول معين.
أضف 1 مل من كل تخفيف متسلسل إلى أنبوب أجار المقابل بينما الأنابيب لا تزال في حمام الماء الساخن. على سبيل المثال ، يجب إدخال 1 مل من التخفيف التسلسلي 10 ^ -1 في أنبوب أجار المسمى "10 ^ -1".
امزج كل أنبوب ثم اسكب كل أنبوب في لوحة بتري مع الملصق المقابل. سيؤدي ذلك إلى تكوين طبقة رقيقة من الأجار تم تلقيحها بالبكتيريا والفيروسات في كل طبق. دع الأطباق تنمو بين عشية وضحاها في حاضنة.
أخرج أطباقك من الحاضنة وافحصها. يجب أن ترى مناطق غائمة في جميع أنحاء الصفيحة حيث نمت البكتيريا ، باستثناء البقع الصغيرة الواضحة التي تسمى اللويحات. هذه اللويحات عبارة عن بقع من البكتيريا الميتة ، وكل لوحة تمثل فيروسًا واحدًا.
خذ عدد اللويحات الموجودة على طبقك واضرب في 10. إذا أحصيت 157 لوحة ، فستحصل على 1570.
اضرب الرقم الذي حصلت عليه في الخطوة السابقة في معكوس الرقم الموجود على أنبوب التخفيف. على سبيل المثال ، إذا كانت اللوحة التي حددتها هي اللوحة 10 ^ -5 ، فستضرب 1570 في 10 ^ 5 لتحصل على 157000000. هذا الرقم النهائي هو عيار العاثية ، ويمثل عدد الفيروسات لكل مل من ثقافتك الأصلية.
