تستخدم عالمة الأحياء الدقيقة تلطيخ الكيتين حتى تتمكن من رؤية الفطريات بوضوح تحت المجهر. تستخدم الفطريات مادة الكيتين كمادة هيكلية في جدران الخلايا بحيث تظهر البقعة جدار الخلية جيدًا. بقعة قطن اللاكتوفينول الزرقاء هي البقعة الأكثر شيوعًا للفطريات. يقتل الفينول الكائنات الحية الدقيقة ويمنع الإنزيمات الفطرية من تكسير الخلية. تحول الصبغة القطنية الزرقاء الكيتين إلى اللون الأزرق. يعد تلوين الكيتين إجراءً مباشرًا نسبيًا باستخدام مواد غير مكلفة. يمكنك صنع صبغة خاصة بك أو شراء صبغة تجارية.
تحضير محلول من قطن اللاكتوفينول الأزرق. قم بوزن 0.05 جرام من صبغة القطن الزرقاء باستخدام ميزان حساس. امزج الصبغة مع 20 مل من الماء المقطر في أنبوب اختبار واتركها طوال الليل.
ارتدِ القفازات قبل الانتهاء من تحضير البقعة في اليوم التالي. ضع 20 مل من حمض اللاكتيك في دورق واخلطه مع 20 جم من بلورات الفينول. قلبي حتى يذوب الخليط. يضاف 40 مل من الجلسرين ويخلط. ثم صفي المحلول الأزرق القطني من خلال قطعة من ورق الترشيح في الدورق واخلطه جيدًا.
بدلاً من ذلك ، استخدم مصدرًا تجاريًا للبقعة. احفظ البقعة في درجة حرارة الغرفة.
قم بتسمية شريحة مجهر باسم أو رقم تعريف العينة. استخدم قطارة واحدة معقمة لوضع قطرة واحدة من عينة ماء في وسط شريحة المجهر. لعينة جافة ، ضع قطرة واحدة من محلول كحول 70٪ على الشريحة ، ثم استخدم حلقة معقمة لخلط العينة الجافة في الكحول.
استخدم قطارة نظيفة لنقل قطرتين من بقعة قطن اللاكتوفينول الزرقاء إلى وسط الشريحة. إذا كنت تستخدم 70 في المائة من الكحول على الشريحة ، فافعل ذلك قبل أن يتبخر الكحول من الشريحة.
المس إحدى حافة انزلاق غطاء المجهر إلى إحدى حواف إعداد العينة الرطبة. دع الانزلاق يسقط برفق على إعداد العينة ، مع التأكد من عدم احتجاز فقاعات هواء أسفل الشريحة. العينة الملطخة جاهزة الآن للفحص تحت المجهر.