Техніка відокремлення бактерій у змішаній культурі

Мікробіологи, генетики та молекулярні біологи використовують бактеріальні культури для відкриття життєвих таємниць. Мікробіологи вивчають бактерії, щоб виявити нові антибіотики для лікування інфекцій. Генетики використовують бактерії, щоб визначити, чи можуть хімікати мати канцерогенні властивості. Молекулярні біологи вивчають біохімічні шляхи клітинних процесів, щоб зрозуміти функції ферментів, які ми маємо спільно з бактеріями. Наскільки різноманітними є дослідження, усі три науки ізолюють бактеріальні культури, використовуючи одну і ту ж техніку: агарова пластина.

Основи мікробів

Багато бактерій мають характерні форми, що допомагають класифікації.

•••Чад Бейкер / Фотодіск / Getty Images

Мікроби - це одноклітинні організми, такі як бактерії та гриби. Ці організми швидко розмножуються і їх легко вирощувати, що робить їх особливо корисними для вивчення. Коли в природі виявляється потенційно новий мікроб, зразок поміщають у середовище для зростання, яке називається «бульйон». Відвари складаються зі стерилізованої води, солей, цукру та інших поживних речовин, що сприятиме швидкому зростанню бактерій у колбі під час інкубація. Однак частіше за все бульйон міститиме більше одного виду бактерій. Щоб виділити одну бактерію, вчений розподілить невелику пробу відвару над напівтвердою агаровою пластинкою, використовуючи мікробну техніку, яка називається «мелірування».

Агарові тарілки

Одягаючи рукавички під час роботи з агаровими пластинами, бактерії з ваших рук не забруднюють зразок.

•••Comstock / Comstock / Getty Images

Агарові пластини - це напівпрозорі напівтверді гелі, що складаються з морських водоростей та певної концентрації поживних речовин. Корисність агару полягає в тому, що він забезпечує гладку, м’яку поверхню для вирощування бактерій. Коли вчений розміщує на агарі одну бактерію, вона розмножуватиметься вдвічі більше тисяч разів і буде виглядати як невелика колонія поодиноких клітин.

Інструменти для мелірування бактерій

Основні інструменти для мелірування колоній бактерій не змінилися з моменту відкриття методики.

•••Photos.com/Photos.com/Getty Images

Для виділення бактерій потрібні три інструменти: агарова пластина, спиртовий пальник і дротова петля. Агарова пластина - це середовище росту, куди переносяться бактерії після вирощування на бульйоні. Спиртовий пальник - це невелика, наповнена спиртом лампа для стерилізації дротяної петлі - довга, тонка ручка, на одному кінці якої прикріплена невелика петля вогнетривкого дроту. Петля буде містити крихітну краплю наповненого бактеріями бульйону при перенесенні бактерій з бульйону на агарову пластинку.

Процес виділення бактерій

Зигзагоподібний рух є найефективнішим способом розповсюдження бактерій по агаровій пластині.

•••Hemera Technologies / Photos.com / Getty Images

Нанесення бактерій через агарову пластину просто, але ви повинні виконати цей етап правильно, інакше ви не виділите окремі колонії. Нагрійте петлю над спиртовим пальником для стерилізації дроту, а потім опустіть кінчик петлі в бульйон. Протягніть кінчик петлі туди-сюди кілька разів на чверті агарової пластини. Знову стерилізуйте петлю та прокладіть смугу поперек і перпендикулярно першим смугам. Перемістіть петлю вперед і назад кілька разів по новій ділянці пластини. Стерилізуйте кінчик. один раз злегка нанесіть на останню смугасту ділянку і кілька разів перемістіть петлю вперед-назад. Прожилки розріджують початкову краплю бульйону до точки, де останні смуги будуть містити поодинокі колонії. Помістіть тарілку в інкубатор або на стільницю при кімнатній температурі і почекайте, поки колонії виростуть протягом ночі. Поодинокі колонії в останній проміжок стануть ізольованими колоніями однієї бактерії.

  • Поділитися
instagram viewer